GSTPULLDOWN技术服务

广州辉骏生物科技股份有限公司为您提供gstpulldown技术服务。gst pull down技术原理
先将体外表达的gst融合蛋白结合到谷胱甘肽beads上，再将靶蛋白-gst-beads和细胞裂解液孵育，这样互作蛋白便一起吸附在beads上。洗涤掉未结合的蛋白后，再用洗脱液将互作蛋白复合物从beads洗脱下来，即gst pull down产物。这种互作复合物既可以用westernblot检测已知蛋白，也可以用质谱鉴定出未知蛋白。
gst pull down实验流程
gst pulldown测定_gst-pull down质谱分析_gst标签蛋白.jpg
gst pull down技术应用
筛选或验证和靶蛋白的互作蛋白。
几种蛋白互作实验的特点
1. gst pull-down：体外表达诱饵蛋白，适合无ip级别抗体、又不易---的情况；
2. ap-ms：体内表达带标签的诱饵蛋白，适合无ip级别抗体、但易---的情况；
3. tap-ms：体内表达带双标签的诱饵蛋白，适合无ip级别抗体、但易---的情况；
4. coip：原汁原味的体内蛋白复合物分离，适合于有---的ip级别抗体的情况；
5. silac-ip：可定量鉴定分析体内蛋白复合物，适合于可传代细胞，尤其是易---细胞。
gst pull down技术服务*辉骏优势
1. 近十年服务经验，众多服务案例，服务成果得到---期刊---；
2. 对蛋白互作的筛选鉴定理解深刻，擅长针对客户情况提出合适的方案建议；
3. 自有分子及细胞生物实验平台，能有效制定并执行---的实验路线；
4. 自有蛋白质组学平台，对微量互作蛋白的质谱鉴定有---的把控能力，对后续的生物信息分析有独到的见解；
5. 售后技术支持将一直保持到客户发表文章，---客户安心进行下游实验及投稿。
gst pull down服务信息
项目名称
客户提供
结果交付
实验周期
gst pulldown wb
实验样本
诱饵蛋白的gst原核表达载体
待测蛋白抗体
实验信息表
1、诱饵蛋白wb检测图
2、待测蛋白wb检测图
3、结果整理图
4、实验报告
3-4周
gst pulldown ms 实验样本
诱饵蛋白的gst原核表达载体
实验信息表
1、诱饵蛋白wb检测图
2、质谱检测结果
3、生物信息学分析结果
4、实验报告
6-7周
gst pull down 客户文献
1. chen s.l. et al: a gys2/p53 negative feedback loop restricts tumor growth in hbv-related hepatocellular carcinoma. cancer research. 2019，if=9.727.
【研究内容】：前期研究表明，gys2基因在hcc---低表达，干扰gys2基因表达导致---增殖转移。本研究通过融合表达gst-gys2、his-p53、his-mdm2，并用gst-pull down方法，证实了mdm2与p53竞争性结合gys2基因。相关的coip、chip-qpcr等实验进一步阐明gys2基因降低---增殖转移的机制。
使用相关技术:gst pulldown测定、gst-pull down质谱分析、gst标签蛋白
2. jiang l. et al: bach1 represses wnt/β-catenin signaling&angiogenesis. circ res. 2015，if=14.467.
【研究内容】：wnt/β-catenin信号在内皮细胞的血管生成活性中起重要作用。过表达实验表明，转录因子bach1过表达可抑制后肢缺血小鼠的血管生成，并抑制wnt3a---的血管生成反应和人脐静脉内皮细胞wnt/β-catenin靶基因的表达。co-ip实验和gst pull-down分析表明，bach1直接与tcf4结合，并减少β-catenin与tcf4的相互作用。研究揭示了bach1抑制外周缺血损伤后的血管生成的作用机制，为血管生成---或其他涉及wnt/β-catenin通路异常调节的---提供了新的---靶点。
使用相关技术:gst 融合蛋白、gst pull-down实验、gst pull-down技术
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     推荐关键词： dige, silac, itraq, chip, 质谱鉴定