牛皮蝇蛆探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

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它具有下列特点：


1. 即开即用，用户只需要提供样品rna模板。2. 引物和探针经过优化，灵敏性高。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 特---高，引物是根据伞枝梨头霉高度保守区设计，不会跟其他---的rna发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μl 体系的探针法荧光定量 rt-pcr 反应。
6. 本产品只能用于科研。
荧光定量pcr服务：


简介：牛皮蝇蛆探针法荧光定量pcr试剂盒实时荧光定量pcr技术于1996年由美国applied biosystems公司推出，该技术不仅实现了pcr从定性到定量的飞跃，而且与常规pcr相比，它具有特---、有效解决pcr污染问题、自动化程度---特点，目前该技术已被广泛用于检测细胞mrna表达量的变化；比较不同组织的mrna表达差异；验证基因芯片，sirna干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量pcr技术服务，全部实验皆使用进口试剂完成，主要定量pcr仪器。1、荧光定量pcr服务要求：
01请您提供新鲜的且尽量多的材料；或直接提供纯化好的总rna大于 5 ug/样品；或直接提供纯化好的dna大于 5 ug/样品。
02请提供已知的全长基因序列。
03请提供尽可能详细的背景资料：dna/rna 来源等
2、荧光定量pcr操作程序
01引物探针设计与合成。
02提取dna/rna，样本逆转录成cdna。
03进行real time pcr实验，进行实验结果分析。
04实验完成后，提供完整的实验报告含软件分析结果及引物等实验材料。
pcr实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×pcr buffer                   
5 μl     dntp mix 2mm             
4 μl     引物110pm                 
2 μl     引物210pm                 
2 μl     taq酶 2u/μl               
1 μl     dna模板50ng-1μg/μl
1 μl      加ddh2o至 50 μl
牛皮蝇蛆探针法荧光定量pcr试剂盒视pcr仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置pcr仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s *** 58℃ 30s *** 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：伞枝梨头霉探针法荧光定量pcr试剂盒结束反应，pcr产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：pcr的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
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