植物原位杂交-科锐诺

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2023-3-27  
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原位杂交是在分子生物学领域应用-广泛的实验技术之一,是在研究生物体发育过程中的一种-重要的分子遗传学的研究方法。其英文名为insitu hybridization,其中in situ为拉丁文,字面的意思理解就是说在其原来的天然的位置处杂交。用已标记的-探针与组织切片或细胞中的待测-中的互补序列杂交, 从而对组织细胞中的-进行定性、定位和相对定量分析。是一种直接、简便的研究基因定位和表达的方法。基本原理--碱基互补配对原理


   在酵母双杂交系统中,植物原位杂交,bd与x蛋白融合,ad与y蛋白融合,如果x、y之间形成蛋白-蛋白复合物,ad与bd会在空间上充分接近,重新构成结构域,启动报告基因的转录。拥有bd质粒的酵母可以在某一缺陷培养基上生长,拥有ad质粒的酵母菌可以在另一种缺陷培养基上生长,通过接合mating或共转化使酵母同时拥有ad与bd质粒。如果bd上的目的蛋白与ad上的诱饵蛋白存在相互作用,这样的酵母可以在三缺及四缺的培养基上生长,并启动β-半乳糖苷酶基因的转录。






细胞特-mrna转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;

组织中-dna/rna的检测和定位,如eb-mrna、人类状瘤-和巨细胞-dna的检测;

癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;

基因在染色体上的定位;

检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等;

分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定,某些的诊断和生物学剂量测定等。


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