1. 从液氮容器中取出冻存管，直接浸入37℃温水中，并不时摇动令其尽快融化。
2. 从37℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加10倍以上培养液，混匀；
3. 离心， 1000rpm，冻存袋供应商，5min；
4. 弃去上清液，加入含10%小牛血培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，37℃培养箱静置培养；
5. 次日更换一次培养液，继续培养。
1.操作人员应戴防护面罩及手套，防止冷冻管可能爆裂之伤害。
2.自液氮或干冰容器中取出冷冻管，检查盖子是否旋紧，由于热胀冷缩过程，此时盖子易松掉。
3.将新鲜培养基置于37℃水槽中回温，回温后喷以70酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。
4.取出冷冻管，立即放入3℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，以7o%酒精擦拭保存管外部，移入无菌操作台内。
5.取出解冻之细胞悬浮液，缓缓加入有培养基之培养容器内(稀释比例为1:10~1:15)，混合均匀，cs250冻存袋供应商，放入培养箱培养。取0.1m1解冻细胞悬浮液作存活测试。
6.解冻后是否立即去除冷冻保护剂，依细胞种类而异，一般而言，大都不需要立即去除冷冻保护剂。
目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除 dmso，去除---，cs50冻存袋供应商，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了会受压过大， 。此外在操作过程中容易污染，所以不。另一种说法为细胞悬液中含有二---dmso，dmso对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液 体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无有异常。
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