上海三维细胞培养仪免费咨询

细胞周期检测技术

细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，所需的时间叫细胞周期时间。

常用的方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法。

细胞凋亡检测

常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，hoechst染色，电镜，tunel。

细胞转移能力检测

常见检测方法：细胞划痕实验，transwell实验，invasion实验

其他实验

细胞程度：软琼脂实验

细胞屏障：跨膜电阻、荧光黄透过率

细胞粘附实验

共培养实验

裸鼠成瘤实验

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什么是传代细胞培养？

       原代细胞或细胞株或细胞系需在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的原代细胞或细胞株或细胞系或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续，这个过程体外培养称为传代细胞培养。一般认为，细胞培养形成单层汇合，细胞密度与生存空间有密切的关系，将培养细胞分散，以1:2或l:3或1:4以上的比率转移分散进行培养，即为传代细胞培养。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数期和停止期。

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细胞传代的一般方法？

       开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(mem-0.2%lh 培养液或mem 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血x清、庆大溶液1 万单位、7.5％nahc03 溶液、0.25％胰蛋白酶、pbs 洗液。

      用具：小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1、细胞吹打管20 ml(以上用具需经121℃至

少15 分钟高压---)、c02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱

      操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态---，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可x疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制mem-0.2%lh 培养液100ml 内，加入灭活小牛血x清10m1，庆大溶液0.3m1，7.5%碳---钠溶液3ml。仅供一般参考。---细胞；先用pbs 洗液冲洗细胞表面1-2 次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使---液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4 天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。

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细胞培养常见问题：冷冻管应如何解冻？

       取出冷冻管后， 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。