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{微生物检测}微生物接种

4、浇混接种

该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45℃左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。

5、涂布接种

与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。

6、液体接种

从固体培养基---菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物---菌液移至固体培养基中，都可称为液体接种。

7、注射接种

该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的yimiao预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些---。

8、huoti接种

huoti接种是专门用于培养---或其它病原微生物的一种方法，因为---必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。所用的huoti可以是整个动物；也可以是某个离体活组织，例如猴等；也可以是发育的鸡胚。接种的方式是注射，也可以是拌料喂养。

注：有所接种必须无菌操作

培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工具(如接种针和吸管等)在无菌条件下接种含菌材料(如样品、菌苔或菌悬液等)于培养基上，这个过程叫做无菌接种操作。在实验室检验中的各种接种必须是无菌操作。

(1)接种灭菌 (2)开启棉塞 (3)管口灭菌 (4)挑起菌苔 (5)接种 (6)塞好棉塞。

什么是---测试

用于测定抗jun药wu体外抑制---生长效力的试验称为---试验。通过---实验，可以测定一个药wu的di---浓度，用以评价该药wu的---性能，这是抗jun药wu的基本的药xiao学数据。主要方法有进行定性测定的扩散法(如---斑试验)和进行定量测定的稀释法(如di---浓度实验)。大肠菌群检验---，并怀疑食品可能受到致病菌污染时可进行致病菌检验。

---剂效力检查法指导原则

---剂效力检查法系用于测定灭菌、非灭菌制剂中---剂的活性，以评价终产品的---效力，同时也可用于指导生产企业在制剂研发阶段---剂的确定。

微生物计数

1.血细胞计数法

将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上，在显微镜下计算4~5个中格的---数，并求出每个小格所含---的平均数，再以此为依据，估算总菌数。

此法的缺点是不能区分死菌和活菌。

对压在小方格界线上的---，应当取平均值计数。

此法可用于测定培养液中酵母jun种群数量的变化

2.稀释涂布平板法

原理:每个活---在适宜的培养基和---的生长条件下可以通过生长形成菌落。培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。

这一方法常用来统计样品中活菌的数目

统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是当两个活多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。

土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含---、酵母、芽孢与孢子等的数量均可用此法测定。但不适于测定样品中丝状体微生物，例如放线jun或丝状---或丝状蓝---等的营养体等。

此法若不培养成菌落，可通过将一定量的菌液均匀地涂布在玻片上的一定面积上，经固定染色后在显微镜下计数，这样又称涂片计数法。染色可用台盼蓝，台盼蓝能使---染成蓝色，可分别计数---和huo细胞。

微生物限度检查

4.供试品中微生物的回收

    微生物的回收可采用平皿法、薄膜过滤法或mpn法。

   1平皿法 平皿法包括倾注法和涂布法。表1中每株试验菌每种培养基至少制备2个平皿，以算术均值作为计数结果。

   倾注法 取照上述“供试液的制备” “接种和稀释”和“抗jun活性的去除或灭活” 制备的供试液1ml，置直径90mm的无菌平皿中，注入15～20ml温度不超过45℃熔化的胰酪大豆胨琼脂或沙氏---琼脂培养基，混匀，凝固，倒置培养。若使用直径较大的平皿，培养基的用量应相应增加。按表1规定条件培养、计数。同法测定供试品对照组及菌液对照组菌数。计算各试验组的平均菌落数。微生物保存基本原理是在挑选优良纯培养物并使其处于休眠状态基础上，人为地创造一个有利于休眠的环境，使其长期保存后仍能保持zhong原有的优良特性。

   涂布法 取15～20ml温度不超过45℃的胰酪大豆胨琼脂或沙氏---琼脂培养基，注入直径90mm的无菌平皿，凝固，制成平板，采用适宜的方法使培养基表面干燥。若使用直径较大的平皿，培养基用量也应相应增加。每一平板表面接种上述照“供试液的制备” “接种和稀释” 和“抗jun活性的去除或灭活”制备的供试液不少于0.1ml。按表1规定条件培养、计数。同法测定供试品对照组及菌液对照组菌数。计算各试验组的平均菌落数。就是说这种微生物在培养时，需要有氧气加入，否则就不能生长---。