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腺-提取-「在线咨询」

发布者:武汉友名生物技术有限公司  时间:2022-4-14 







真核细胞同源重组法

1994 年,graham f建立了在293细胞同源重组产生重组腺---的方法。这个方法需要2个质粒:骨架质粒含有腺---绝大部分基因组序列,但不含有包装信号;穿梭质粒含有itr、包装信号和目的基因克1隆位点,以及两段与骨架质粒有重叠的序列。将目的基因克1隆到穿梭质粒,与骨架质粒共转染293细胞,由于这两个质粒的部分序列有重叠,能够在细胞内发生同源重组,zui终产生完整的载体基因组,并包装出重组---颗粒。该方法曾经被广泛使用,推动了腺---载体的发展。由于细胞内重组效率低,某些重组事件还可能产生可copy---(rcv),必需经过噬斑纯化才能获得正确的克1隆化的重组---,费时费力,正逐渐被其他方法替代。



20世纪50年代以后,随着分子遗传学的发展,尤其是沃森和克里克提出dna双螺旋结构以后,人们进一步认识了基因的本质,即基因是具有遗传效应的dna。研究结果还表明,每条染色体只含有1~2个dna分子,每个dna分子上有多个基因,每个基因含有成百上千个脱氧核苷酸。自从rna---发现之后,基因的存在方式不仅仅只存在于dna上,还存在于rna上。由于不同基因的脱氧核糖核苷酸的排列顺序碱基序列不同,因此,不同的基因就含有不同的遗传信息。1994年中科院曾邦哲提出系统遗传学概念与原理,探讨猫之为猫、虎之为虎的基因逻辑与语言,提出基因之间相互关系与基因组逻辑结构及其程序化表达的发生研究。



20世纪初孟德尔的工作被重新发现以后,他的定律又在许多动植物中得到验证。1909年丹麦学者w.l.约翰森提出了基因这一名词,用它来指任何一种生物中控制任何性状而其遗传规律又符合于孟德尔定律的遗传因子,并且提出基因型和表现型这样两个术语,前者是一个生物的基因成分,后者是这些基因所表现的性状。

1910年美国遗传学家兼胚胎学家t.h.摩尔根在果蝇中发现白色复眼white eye, w突变型,首先说明基因可以发生突变,而且由此可以知道型基因w+具有使果蝇的复眼发育成为红色这一生理功能。1911年摩尔根又在果蝇的x连锁基因白眼和短翅两品系的杂交子二代中,发现了白眼、短翅果蝇和正常的红眼长翅果蝇,首先-位于同一染色体上的两个基因可以通过染色体交换而分处在两个同源染色体上。交换是一个普遍存在的遗传现象,不过直到20世纪40年代中期为止,还---没有发现过交换发生在一个基因内部的现象。因此当时认为一个基因是一个功能单位,也是一个突变单位和一个交换单位。






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