生物素-酪胺信号放大试剂盒hrp底物 酪胺信号放大技术tsa, tyramide signal amplification主要原理是,在---0---存在情况下,标记在抗0体上的hrp将底物酪胺活化,后者与相邻的蛋白上的酪氨酸残基生成稳定的共价结合,因此这些蛋白如hrp、抗0体上会富集大量带有生物素标记的酪胺,使信号被有效放大。生物素为小分子化合物,分子量244。亲和素与生物素有---的亲和力,结合牢固,而且特---高,每个亲和素可结合4个生物素。用小分子生物素与hrp酶标记的亲和素发生特---反应,可减小抗原抗0体反应的空间位阻,使反应明显放大。
通用步骤
加血0清封闭液
1. 去掉片子上多余缓冲液。
2. 取适量血0清封闭液完全覆盖切片。
3. 在湿盒中室温孵育 15min。
4. 浸入洗涤缓冲液中 5min。
加一抗
1. 去掉切片上的多余洗涤缓冲液。
2. 将稀释的一抗加到切片上,完全覆盖组织细胞。
3. 在湿盒中室温孵育 30min。
4. 用洗涤缓冲液洗去一抗,在洗液中润洗 5min。
注:如果显色速度过快,建议进一步稀释一抗,将一抗稀释度以 1/50、1/100、1/200、1/400 和 1/800,生物素标记试剂盒,zui佳稀释度的选择是显色 10min 后阳性显色效果满意而没有背景显色。
运输、储存和有效期
常温运输,室温避光保存,有效期 12 个月。
操作方法
苏0木0精染液细胞学染色步骤:
1. 脱蜡,水化。
2. 将组织片浸入苏0木0精染液 1~2 分钟。
3. 换两次蒸馏水,每次浸入 10~20 次。
4. 蓝化:0.5~1%---,30 秒~1 分钟,涂片应该变蓝色。
5. 换两次蒸馏水,每次浸入 10~20 次。
6. 1%伊红水溶液 5~10 分钟
7. 蒸馏水快洗
8. 换三次 95%---,每次浸入 10~20 次。
9. 换两次无水---,每次浸入 10~20 次。
10. 换三次二甲0---,每次浸入 10~20 次。
11. 封片。
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