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1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；
2.次日洗涤3次；
3.加一定稀释的待检样品未知0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时，洗涤；
4.同时---白、阴性及阳性孔对照于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗0.1ml；
5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；
6.然后用ddw洗涤。
其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
1．elisa试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，使用排加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，玉米赤霉烯酮elisa试剂盒报价，做复孔。如标本中待测物质含量过高样本od值大于标准品孔*孔的od值，玉米赤霉烯酮elisa试剂盒价格，请先用样品稀释液稀释一定倍数n倍后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数×n×5。
5．封板膜只限---使用，玉米赤霉烯酮elisa试剂盒，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按污染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
将目标包被于微孔板中，玉米赤霉烯酮elisa试剂盒，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的结合，然后加入微生物化的目标，将未结合的生物素洗净后，加入hrp标记和亲和素，再次洗涤后加入tmb底物显色。tmb在---化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。在450nm波长下测定吸光度o.d.值，计算样品浓度。
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