(1)将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条，装入0.6×8cm的安瓿管中，每管1-2张，塞以棉塞，1.05kg/cm2>;，121.3℃灭菌30分钟。
(2)将需要保存的，在适宜的斜面培养基上培养，使充分生长。
(3)取灭菌脱脂牛乳1-2ml滴加在灭菌培养皿或试管内，降cod低温生物菌种多少钱，取数环菌苔在牛乳内混匀，制成浓悬液。
(4)用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内，使其吸饱，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。
(5)将安瓿管放入内有二磷作吸水剂的干燥器中，用真空泵抽气至干。
(6)将棉花塞入管内，用火焰按图ⅶ-13熔封，保存于低温下。
(7)需要使用，-培养时，可将安瓿管口在火焰上烧热，滴一滴冷水在烧热的部位，降cod低温生物菌种，使玻璃破碎，再用镊子敲掉口端的玻璃，待安瓿管开启后，取出滤纸，放入液体培养基内，置温箱中培养。
-、酵母菌、丝状-均可用此法保藏，前两者可保藏2年左右，有些丝状-甚至可保藏14-17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便，不需要特殊设备。
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(1)准备安瓿管用于液氮保藏的安瓿管，要求-受温度突然变化而不致破碎，因此，需要采用硼硅酸盐玻璃制造的安瓿管，安瓿管的大小通常使用75×10mm的，或能容1.2mm液体的。
(2)加保护剂与灭菌保存-、酵母菌或霉菌孢子等容易分散的细胞时，则将空安瓿管塞上棉塞，1.05kg/cm2，121.3℃灭菌15分钟:若作保存霉菌菌丝体用则需在安瓿管内预先加入保护剂如10%的甘油蒸馏水溶液或10%二甲-蒸馏水溶液，加入量以能浸没以后加入的菌落圆块为限，而后再用1.05kg/cm2>;，121.3℃灭菌15分钟。
(3)接入将用10%的甘油蒸馏水溶液制成菌悬液，装入已灭菌的安瓿管;霉菌菌丝体则可用灭菌打孔器，从平板内切取菌落圆块，降cod低温生物菌种公司，放入含有保护剂的安瓿管内，然后用火焰熔封。浸入水中检查有无漏洞。
(4)-再将已封口的安瓿管以每分钟下降1℃的慢速-至-30℃。若细胞急剧冷冻，则在细胞内会形成冰的结晶，因而降低存活率。
(5)保藏经-至-30℃的安瓿管立即放入液氮冷冻保藏器(图ⅶ-14)的小圆筒内，然后再将小圆筒放入液氮保藏器内。液氮保藏器内的气相为-150℃，液态氮内为-196℃。
(6)恢复培养保藏的需要用时，降cod低温生物菌种，将安瓿管取出，立即放入38-40℃的水浴中进行急剧解冻，直到全部融化为止。再打开安瓿管，将内容物移入适宜的培养基上培养。
此法除适宜于一般微生物的保藏外，对一些用冷冻干燥法都难以保存的微生物如支原体、衣原体、氢-、难以形成孢子的霉菌、噬菌体及动物细胞均可长期保藏，而且性状不变异。缺点是需要特殊设备。
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