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染色质免l疫共沉淀技术(chip)

基于体内分析而发展的染色质免l疫沉淀分析chr omat in immunoprecipitat ionassay kit, chip)技术可以真实、完整地反映结合在dna序列上的调控蛋白。由于chip采用甲醛固定活l细胞或者组织的方法,因此能比较真实的反映细胞内tf与promoter的结合情况,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。近年来,这种技术得到不断的发展和完善。采用结合微阵列技术在染色体基因表达调控区域检查染色体活性,是深入分析癌l症、心血l管病以及中央神经系统紊乱等---主要通路的一-种非常有效的工具。

染色质免l疫沉淀分析(chip) 的基本原理是在活l细胞状态下,当用甲醛处理时,相互靠近的蛋白与蛋白、蛋白与---(dna或rna)之间会产生共价键。细胞内,当f与promoter相互结合时,它们必然靠的比较近或者契合在一起,这个时候用甲醛处理,能使它们之间产生共价键。固定的蛋白质dna复合物通过超声或酶处理将其随机切断为-定长度范围内的染色质小片段然后通过抗原抗l体的特---识别反应沉淀此复合体,特---地富集目的蛋白结合的dnal片段,四川pcr,通过对目的片断的纯化与检测,---多少钱,从而获得蛋白质与dna相互作用的信息。通过qpcr或二代测序,筛选与目的蛋白互作的未知dna信息。





5.长可以合成多长的引物?

答:引物越长,出现问题的概率就越大。有的公司合成过120base的引物,产率很低。除非需要,建议合成片段长度不要超过80mer,pcr,按照目前的引物合---率,80mer的粗产品,全长还不一定正确引物的百分比不会超过40%,后续处理还有丢失很多,的产量很低。

6.需要合成多少od数?

答:根据实验目的确定。一般pcr扩增,2 od引物,可以做200-500次50ul标准pcr反应。如果是做基因拼接或退火后做连接,1 od就足够了。但是有些研究人员,就做几次pcr,但是却要5-10 od。做全基因构建的引物都比较长,但是我们有些研究人员也要求高od数。片段越长, 全长得率就越低,出错的几率就越大。超出需要之外的od数要求,其实也是对社会资源的一种浪费,同时也从一个侧面反映了部分研究人员---是新手的自信心不足,总觉得需要重复多次才能成功。





分子生物学检测服务

随着生命科学和化学的不断发展,人们对生物体的认知已经逐渐深入到微观水平。从单个的生物体到qi官到组织到细胞,再从细胞结构到---和蛋白的分子水平,人们意识到可以通过检测分子水平的线性结构如---序列,来横向比较不同物种,同物种不同个体,同个体不同细胞或不同生理病理状态的差异。这就为生物学和医学的各个领域提供了技术平台。分子生物学检测技术是现代分子生物学与分子遗传学取得进步的结晶,---,是在人们对基因的结构以及基因的表达和调控等生命本---题的认识日益加深的基础上产生的。近年来,分子生物学检测技术的方法学研究取得了进展,先后建立了各种分子生物学检测技术。







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