在低浓度时,edinburgh荧光光谱仪代理,溶液的荧光强度与荧光物质的浓度成正比:f=kc。其中,f为荧光强度,c为荧光物质浓度,k为比例系数。这就是荧光光谱定量分析的依据。
上述关系不适用于荧光物质浓度过高时,荧光物质浓度过高,其荧光强度反而降低。原因有:
1内滤效应。一是,当溶液浓度过高时,溶液中杂质对入射光的吸收作用增大,相当于降低了激发光的强度。二是,浓度过高时,入射光被液池前部的荧光物质-吸收,处于液池中、后部的荧光物质,则因受到入射光-减弱而使荧光强度-降低;而仪器的探测窗口通常对准液池中部,从而导致检测到的荧光强度-降低。
2相互作用。较高浓度溶液中,可发生溶质间的相互作用,edinburgh荧光光谱仪报价,产生荧光物质的激发态分子与其基态分子的二聚物或其他溶质分子的复合物,从而导致荧光光谱的改变和/或荧光强度下降。当浓度时,甚至会形成荧光物质的基态分子-体,导致荧光强度更-下降。
3自淬灭。荧光物质的发射光谱与其吸收光谱呈现重叠,张家口edinburgh荧光光谱仪,便可能发生所发射的荧光被部分再吸收的现象,导致荧光强度下降。溶液浓度增大时会促使再吸收现象加剧。
当然,荧光强度的影响因素还有溶剂、温度、ph值、散射光等,在定量分析中需要加以考虑。
荧光光谱定量分析的计算与其他光谱类似,包括标准曲线法、比例法等。
灵敏度高:荧光分析的特点是灵敏度高,edinburgh荧光光谱仪,通常情况下要比分光光度计的灵敏度高出2-3个数量级。
选择性强:包括激发光谱和发射光谱,在鉴定物质时,通过选择波长可以使分子荧光分析有多种选择。
试样量少和方法简便。
能提供比较多的物理参数:如激发光谱、发射光谱、荧光强度、产率、荧光寿命、荧光偏振等参数。这些参数反映了分子的各种特性,并通过它们可以得到被检测分子的更多信息。
荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点,可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。荧光分光光度计的发展经历了手控式荧光分光光度计,自动记录式荧光分光光度计,计算机控制式荧光分光光度计三个阶段;荧光分光光度计还可分为单光束式荧光分光光度计和双光束式荧光分光光度计两大系列。其他的还有低温激光sh p olskill荧光分光光度计,配有寿命和相分辨测定的荧光分光光度计等。
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