难点与关键点
将灌注针插入主动脉内是灌注固定的关键，也是难点。首先准确找到主动脉，这是此步骤的要点。可用温生理盐水将胸腔内的-冲洗干净，用镊子轻轻夹住心 外膜夹的越少越好，以免影响取材将-向左上方提起，即可看清主动脉，又可使灌注针很容易地插入主动脉内。插入时动作要慢，针尖方向不要偏向右侧，动物模型实验，以 免刺入右心房，如果感到有阻力，则将针退后、调整方向重新进针，直到进入主动脉，灌注针进入主动脉后可在-的上方看到其位置，灌注针进入主动脉的长度 好为 3~5 毫米，然后用丝线扎紧。切勿将灌注针放在左心室内，这样由于主动脉瓣的关闭，灌注液很难进入主动脉，而是沿着心室的切口流出，致使灌注失败。另 外，灌注针插入成功后，一定要用剪刀剪开右心耳而不是右心室，这是灌流液的出口。剪开心尖的位置一定要掌握好，不能偏右使灌注针插入右心室。
因 sp 是单只大鼠进行实验且在实验中大鼠的活动空间受限，故有学者认为以上的-与实验室表现可能与大鼠的群体隔离或活动空间受限有关，模型动物，进一步研究发现，在实验前群体饲养的动物当与群体隔离后也会出现攻击行为增加，血浆中 cort 增加，功能抑制等表现。大鼠活动空间受限也可引起血浆中 cort 的水平的增加，这些结果与单平台睡眠剥夺实验中见到的类似，为克服sp 中大鼠与群体分离及活动空间受限的缺点，在 sp 基础上进一步发展为多平台睡眠剥夺法。
1.2多平台睡眠剥夺法
m p法于1981年先应用在大鼠睡眠剥夺实验中，在 m p中为扩展大鼠的活动空间将台由 sp 中的 1 个增加至 7 个，仍将1只大鼠放在台间进行睡眠剥夺试验，因大鼠可以在 7个台间自由活动，故活动范围较 sp 中有明显增大。经实验比较，广安动物模型，在m p中反映应激增强的一些指标，如上腺重量增加和胸腺重量减少仍然存在，实验动物模型公司，甚至在大鼠-中 acth %cort 的增加及上腺重量的增加较sp的更高，提示 m p较sp有-的应激性!考虑到大鼠为群居动物，单只大鼠实验易导致与所在群体的隔离。为克服群体隔离所带来的应激反应，有学者将 m p 法进一步改良发展为改良多平台睡眠剥夺法!
高架十字迷宫试验 ：
epm ) 既可以建立焦躁应激的模型也是国际上-的-测量焦躁反应的方法。其原理是利用动物对新异环境的探究特性和对高悬敞开臂的恐 惧心理， 形成动物的矛盾冲突来考察大鼠的焦躁状态。 epm 测试的项目中， 焦躁动物的 oe% 和 ot% 会明显降低， -抗焦躁药则使两者升高， oe + ce 反映了动物的运动活性。本研究发现模型组大鼠的 oe% 和 ot% -下降， 运动活性也降低。hd反映了动物在非保护区内的探索行为， 代表动物对陌生环境的好奇探究或因恐惧而寻求逃避， 与焦躁程度有一定相关性， 本研究中空瓶应激后的大鼠 hd行为减少; rr可用来观察药有无-作用及-强度。上述结果证实， 慢性应激后的大鼠明显处于焦躁状态， 说明慢性焦躁应激大鼠模型的制备成功， 且通过量化的标准客观反映出大鼠的焦l虑程度。
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