反相hplc应当是-的分离小肽方法,用ch3cn或ch3oh:h2o95:5做流动相,看保留如何,若无保留,高压制备色谱系统,建议改用其他色谱方法进行分离。
关于多肽的分离,首先要知道它的分子量大小,高压制备色谱系统哪个生产厂家好,然后选择不同类型的填料,如孔径的大小。我们先在分析柱4.6mm内径上做一下实验,高压制备色谱系统,找到很大的分离度,这一过程的难度是很大的,要不断地改变流动相和固定相,然后再线性或非线性放大到制备,放大的倍数按分析柱的实验结果。分离后可以通过冷冻干燥得到固体。
还可以考虑离子交换来分l离。
可以考虑先在低温下,减压旋蒸除去其中的有机的溶剂,高压制备色谱系统哪个牌子好,然后用萃取的方法把产品萃取出来,然后再低温再旋蒸,这样,就可以不将温度升得-而得到产品。如果要直接蒸掉流动相,水泵的真空度要注意要检查气密性,否则蒸水会很慢。一般比较好的泵在60~70度即可蒸掉水,如果泵的真空度不好,可能需要80~90度才行,这样容易暴沸导致样品损失。温度太高可能引起物-性。
1. 亲水色谱填料:
主要适用于非极性至中等极性的中小分子化合物的分离,硅胶表面的硅-或其极性基团极性较强。主要应用于合成化学、天然产物、精细化工、石油产品等领域的分离和提纯。
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