贝科新肽-GISH

原位杂交是一种生物学技术，它可以在细胞或组织中特定部位检测dna或rna的存在，而不需要将dna或rna分离出来。这项技术使用标记的dna或rna探针，gish，与细胞或组织中的相应dna或rna进行特-结合，然后通过光学显微镜或电子显微镜观察探针的位置和数量。

原位杂交的原理很简单。dna或rna分子具有互补的核苷酸序列，因此可以通过氢键相互结合。将标记的dna或rna探针与细胞中的dna或rna进行杂交，可以特-地检测这些探针的位置和数量。探针的数量和位置可以反映dna或rna在细胞中的水平和分布。

将32 p标记的双链dna探针于100℃加热5分钟，迅速置于冰浴中。单链探针不必变性。将探针加到杂交袋中杂交过夜。杂交期间，盛滤膜的容器应盖严，以防液体蒸发。

杂交结束后，去除杂交液，立即于室温把滤膜放入大体积300-500ml的2×ssc和0.1% sds溶液中，轻轻振摇5分钟，并将滤膜至少翻转一次。重复洗 一次，同时应避免膜干涸。

68℃用300-500ml 1×ssc和0.1% sds溶液洗膜两次，每次1-1.5小时。此时已可进行自显影。如背景-或实验要求严格的洗膜条件，可用300-500ml 0.2×ssc和0.1% sds的溶液于68℃将滤膜浸泡60分钟。