菌株的鉴定:对筛选得到的乳酸菌进行16s rdna序列分析,确定其种属。将活化好的菌液,进行菌株的全基因组脱氧核糖-(deoxyribonucleic acid, dna)的提取[16],黄冈农业解淀粉芽孢杆菌,然后对基因组dna的16s rdna区域进行pcr扩增,上游引物27f序列5′-agagtttg-ctggcctca-3′,下游引物1492r序列:5′-ggttaccttgttacgactt-3′,扩增片段为1 500 bp。pcr体系50 μl:10×buffer 5 μl;脱氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate,农业解淀粉芽孢杆菌采购, dntp) 5 μl;上游引物(25 μmol/l)0.5 μl;下游引物(25 μmol/l)0.5 μl;taq dna 聚合酶(250 u)0.5 μl;模板dna 1.5 μl ;ddh2o 37 μl。pcr扩增条件为:95 ℃ 3 min;95 ℃ 10 s;55 ℃ 30 s;72 ℃ 1 min;72 ℃ 5 min,2~4反应步骤进行30个循环。扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测其纯度及浓度,将达到测序要求的扩增产物送海华大基因进行测序,将测序结果在美国国立生物技术信息中心(national cct for biotechnology information, ncbi)上blast进行比对,并确定其种属。
解淀粉芽孢杆菌是一种广泛分布于大自然中的革兰氏阳性菌,具有很强应用潜力。解淀粉芽孢杆菌属于芽孢杆菌属,由于它可以产生液化淀粉酶分解淀粉而被命名为解淀粉芽孢杆菌。将解淀粉芽孢杆菌施入土壤或水体中,能够降解自然界中一些有毒物质,净化被污染的土壤和河流湖泊。解淀粉芽孢杆菌又是典型的植物促生菌,能够分泌蛋白、、酶或多肽等活性物质,促进植物生长,-植物-病害。由于解淀粉芽孢杆菌能够分泌多种活性物质,对果蔬表面的病菌有广泛的抗性,能够解决果蔬保鲜和长期储存问题。
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