荧光现象的原理将荧光物体放到光谱中的各域,就可发现引起荧光的光线是光谱上波长较短的区域,即近紫外线区域,波长约为320-400nm。这种现象的实质是分子吸收了短光的能量波长越短,光能越强,又以发光的形式以波长较长和荧光射出,而为人眼可见,这就是荧光现象。荧光接近可见光的红光端,大部分的荧光现象是符合这一规律的。荧光现象可分为两种:1.次荧光现象;又称固有荧光或自发荧光,当经紫外线的照射后,就能发出荧光的物质;2.第二次荧光现象:又称激发荧光,当经紫外线照射后不能或只部分发生微弱的荧光,这样就需先用荧光素处理,再经紫外线照射才能发生荧光,这是因组织内吸附或溶解有荧光素的缘故。
光学显微镜不同种类的照明光源早期的显微镜依靠油灯和自然的阳光,他们的原始但往往---确显微镜提供外部照明光源。他们往往雇用相当巧妙的方法,如收集光从一个大的白板上或在阴天的散射阳光的反射。不幸的是,这些方法没有提供---的照明和经常视场照明的面积---超过物镜的数值孔径,引起眩光和水浸。光学显微镜不同种类的照明光源(图1)现代显微镜通常有一个不可分割的光源,可以控制到相对高的程度。今天的显微镜常见的来源是白炽钨卤素灯泡的反射壳体中定位,投射光通过聚光透镜到台下聚光。通过可变的可变电阻器,通常集成到显微镜支架灯电压控制。如图1所示是一个典型的照明灯和住房。灯泡是一个操作上的12伏的直流dc电压,徕卡金相显微镜经销商,并产生---100瓦的功率进行照明的卤钨灯。灯电压控制的直流电源,通常内置在显微镜壳体,徕卡金相显微镜供销,用电压控制旋钮,邢台徕卡金相显微镜,通常是一个电位器上的某个地方安装显微镜支架。这些灯泡在操作过程中产生大量的热量,在壳体上设置有散热片的一些层,以帮助消散多余的热量。灯泡的位置是由一系列的旋钮控制照明器壳体的侧面上,或预先为本专为壳体。灯箱的光通过聚光透镜图1引导到显微镜的基础上,然后通过烧结玻璃扩散器的冷凝器上的孔径光阑被-前经常。
荧光显微摄影由于荧光图像一般均较明场观察暗得多,所以进行荧光显微摄影需要较长的---时间,在---时应注意避免荧光显微镜震动。为了缩短---时间,徕卡金相显微镜销售,可选择倍率较低的摄影目镜或感光度较高的摄影胶片如asa200以上或din24以上。荧光显微镜摄影技术对于记录荧光图像十分---,由于荧光很易褪色减弱,要即时摄影记录结果。方法与普通显微摄影技术基本相同。因紫外光对荧光猝灭作用大,如fitc的标记物,在紫外光下照射30s,荧光亮度降低50%。所以,---速度太慢,就不能将荧光图像拍摄下来。一般研究型荧光显微镜都有半自动或全自动显微摄影系统装置。
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