该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精que的，但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖-酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0．2%影响测定结果。如tritonx-100、sds、np-40等。
1．bradford浓染液的配制：将100mg考马斯亮蓝g-250溶于50ml 95%-，加入100ml85%的磷酸，然后，大同工业级亮蓝，用蒸馏水补充至1000ml，此染液放4℃至少6个月保持稳定。
2．标准曲线蛋白质样本的准备：尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品，例如测定抗ti，可用纯化的抗ti作为标准。如果待测样本是未知的，也可用抗ti作为标准蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之间绘制标准曲线。
3．将待测样本溶于缓冲溶液中，该缓冲溶液应与制作标准曲线的缓冲溶液相同(hao用pbs)。
4．按1：5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液，如出现沉淀，过滤除去。
5．每个样本加5ml稀释的染料结合溶液，作用5～30min。染液与蛋白质结合后，将由红色变为蓝色，在595nm波长下测定其吸光度。注意，显色反应不得超过30min．
6．根据标准曲线计算待测样本的浓度。
一般品名：食用青色1号
英文名：brilliant blue fcf
性状
本品为有金属光泽，带红色的紫-末或颗粒，无臭味。易溶于水，呈绿色蓝色溶液 ，溶于-、甘油、-。耐光、耐热性强。对柠檬酸、酒石酸、碱均稳定。
制法
由邻磺酸与n-，n-3-磺基芐基-缩合后氧化制得。
标准
项目
指标
gb 7655.1
fao/who
fcc
日本食品添加物公定书
亮蓝60
亮蓝85
含量/%***
60.0 85.0
85
85.0
85
干燥失重/%≤
10.0
15
15
10.0
氯化物、-盐/%≤
1.0
15
15
4.0
水不溶物/%≤
0.3 0.2
0.2
0.20
0.20
萃取物/%≤
0.3
-
-
-
萃取物/%≤
-
0.2
0.4
-
副染料/%≤
6.0
6.0
6.0
合格
/%≤
0.0001
0.0003
0.0003
重金属/%≤
0.001
0.004
-
0.0004
铬/%≤
0.005
0.005
0.005
0.002
锰/%≤
0.005
-
-
0.005
铅/%≤
-
0.001
0.0010
0.005
隐色体/%≤
-
5.0
5.0
-
未结合中间体及副反应物邻、间、对磺基/%≤
-
1.5
1.5
-
芐-酸/%≤
-
0.3 0.3
-
铜、铬、锌、锑、钡-盐/%≤
总芳伯胺/%≤
0.01
1.用途：一种-型酸性染料。主要用于食品、饮料着色，也用于羊毛、蚕丝的染色及制造色淀。水溶性合成色素，鲜艳的嫩黄色，工业级亮蓝批发，广泛用于冰淇淋、雪糕、果冻、酸奶、饮料、罐头、糖果包衣等的着色。
根据中国《食品添加剂使用卫生标准》gb2760-1996规定：用于高糖果汁味或果汁味或果汁味饮料、碳酸饮料、配制酒、糖果、糕点上彩装、西瓜酱罐头、青梅、虾味片、渍制小菜、红绿丝，使用量0.1g/kg；考马斯亮蓝g250在游离状态下呈红色，当它与蛋白质通过疏水结合后变为蓝色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有da光吸收。用于冰淇淋，使用量0.02g/kg。用于植物蛋白饮料、乳酸菌饮料，用量0.05g/kg。
2.使用量：一般为0.025g/kg。
3.使用方法：将准确称量的本品置于容器中，逐渐加入适量温水，并不断搅拌使之完全溶解，所得溶液即可用于着色。
使用过程中应注意避免或减少酸、减、氧化计、还原计、金属离子、微生物等物质的-影响，并注意免受高温与暴晒，以防褪色或变色。
4.复合着色剂的使用：根据需要，可将本品与本公司生产的其它色泽的着色剂按适当比例配置各种不同的颜色。
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