原位杂交-思特进(商家)

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2021-6-6  
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原位杂交是指将特定标记的已知顺序-为探针与细胞或组织切片中-进行杂交,从而对特定-顺序进行精0准确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。

原位杂交in situ hybridization将标记的-探针与细胞或组织中的-进行杂交,称为原位杂交。

使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置。



根据不同的杂交实验要求,应选择不同的-探针。在大多数情况下,可以选择克0隆的dna或cdna双链探针。但是在有些情况下,必须选用其它类型的探针如寡核苷酸探针和rna探针。例如,在检测靶序列上的单个碱基改变时应选用寡核苷酸探针,在检测单链靶序列时应选用与其互补的dna单链探针通过克0隆人m13噬菌体dna获得或rna探针,寡核苷酸探针也可。长的双链dna探针特---较强,适宜检测复杂的靶核苷酸序列和病原体 ,但不适宜于组织原位杂交,原位杂交,因为它不易透过细胞膜进入胞内或核内。在这种情况下,寡核苷酸探针和短的pcr标记探针80~150bp具有较大的---性。



杂交流程

杂交液的成分主要影响了-杂交的复性动力学和热稳定性。杂交液的基础成分为:denhardts溶液ficoll,bsa,pvp,异源-如鲱精3子dna/trna/竞争dna,磷酸钠,edta,sds,盐离子,---胺和---葡聚糖,以及杂交探针。不同的应用中进行杂交温度、ph、盐离子、---胺、探针浓度等条件的优化。常用的ph范围为6.5~7.5,较高的ph值有助于提高杂交的严谨性。



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