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蛋白结晶板使用

蛋白质是水产品的主要组分,其含量测定在水产品加工及研究等方面应用-广泛.目前,各蛋白含量快速测定方法通常是在试管中进行反应并应用分光光度计测定,其操作过程较繁琐,分析大批量样品时效率低,上述缺点在高通量筛选、检测等场合尤为-.为了克服该不足,实现蛋白含量的快速高通量测定,96uv结晶板,本研究基于folin-酚法,利用96孔板作为反应器并配合比色,建立了一种蛋白含量测定的微孔板方法并评价其合理性.该法测得样品的蛋白含量与常规法结果无-性差异,反应在30-90 min显色稳定,标准曲线的线性相关系数r2=0.9922,标准偏差范围为0.07%-0.78%,检测限为10 μg.与常规法相比,微孔板法保持了folin-酚法的准确性及稳定性,96uv结晶板,同时具有通量高、节省样品、试剂及测定时间等优点,在蛋白高通量快速测定方面更具优势。




蛋白结晶板作用

随着人类基因组测序计划的完成 ,鉴定细胞内蛋白质表达,结构,功能及相互作用方式等成为后基因组时代的主要目标之一.为此 ,需要高通量的蛋白质组学研究的技术和方法.近年来出现的表面增强激光解吸 /电离,蛋白质芯片技术是一种操作简单 ,96uv结晶板报价,方便快捷 ,样本需要量少 ,敏感性高 ,特-强的高通量的研究蛋白组学的方法 ,在蛋白质功能分析,标志物筛选,研发等方-有广泛的应用前景。




蛋白质结晶涉及四个重要步骤

1. 蛋白质纯度的确定。如果不够非常纯,必须要进一步纯化。

2. 蛋白质溶解于合适的溶剂中,从中它能通过一种盐或有机化合物而析出。溶剂通常是水-缓冲剂溶液,有时加,如2--2,4-mpd。正常情况下,沉淀剂也被加入,但是浓度不高于使沉淀产生。对于不溶于水-缓冲剂或水-的膜蛋白,还需要加入去污剂。

3. 使溶液过饱和。在这一步中,小-体形成,它是晶体生长所需的核。对小分子的结晶来说,相比于蛋白质更为人熟知,晶核的自发形成需要提供表面张力能。一旦这个能障被突破了,晶体开始生长。能障在高水平的过饱和度时很容易克服。因此,在高过饱和度时,晶核更易自发形成。晶核的形成可作为一个过饱和度和其他参数的函数通过多种方法来研究,包括光散射、荧光去极化及电子显微镜。

4. 一旦晶核形成,晶体生长正式开始。对低分子量的化合物而言,新分子会逐步结合到正在生长的晶体表面。这是由于这些位置的结合能比较大,相对于分子结合到平滑的表面。这些步骤要么由晶系缺陷造成,要么发生在表面随机形成的晶核。





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