8周标准兔多抗制备佐剂-博特龙(在线咨询)

抗原制备及纯化

抗原制备: 参照文献［10］制备 mrj 抗原。复苏pet28a-mrj 转 rosetta 菌0种 接 种 于 具 kana 抗 性 的10 ml液体培养基中的，37 ℃ 培养过夜，次日以 1∶ 50转瓶进行扩大培养，当菌液 od600达 0． 6 时加入浓度为 5 mmol /l 的 iptg，8周标准兔多抗制备佐剂，37 ℃ - 8 h 超声碎裂后进行考马斯亮蓝染色检验，有目的蛋白的大量表达。抗原大量制备及纯化: 以 5 × 10 -4 mol /l 浓度的iptg，37 ℃ 条件下大量-( 200 ml 菌液) 8 h 后收集样品，超声裂解后将所得 mrj 蛋白过 ni-ida 凝胶柱亲和纯化，考马斯亮蓝染色后检测目的蛋白纯度高于 90% ，可用于单克0隆抗0体制备动物免0疫的抗原。

饲养层细胞制备

于细胞融合前---，准备饲养层细胞，常选用小鼠腹腔渗出细胞，其中主要是巨噬细胞和淋巴细胞。应用腹腔渗出细胞的好处是: 一方面做饲养细胞，另一方面巨噬细胞可以吞噬死0亡的细胞和细胞碎片，为融合细胞的生长造成---的环境。腹腔细胞的数目应适宜，过少则不能提供杂交瘤细胞所需要的生长因子，过多会阻碍杂交瘤细胞的贴壁，一般以铺满孔底 30% 为好。