使用方法
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度按每针次50μl用量配制。
备注：使用的抗原用量为
1免0疫原性较弱的合成肽每针次10-100μg；
2亚单位蛋白抗原每针次1-10μg；
3免0疫原性较强的灭活病原微生物和---样颗粒抗原每针次1-10μg；
4肿0瘤细胞裂解物每针次10-100μg。
2. 37oc水浴中解冻佐剂，充分混匀，无菌条件下取出所需用量按每针次50μl与抗原按体积比1:1混匀。
3. 通过后腿小腿肌肉或腹0股0沟皮下0注射免0疫小鼠，每只小鼠注射100μl。
4. 第7天按同样方式加强免0疫1针。备注：每次免0疫佐剂和抗原现配现用
5. 第014天通过elispot、胞内细胞0因子染色、mhc四聚体染色或其他可行方法检测脾0脏或---淋巴0结中的抗原特---cd4+ th1和/或cd8+ ctl反应。
通过后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠视频，2周快速鼠多抗制备佐剂，每只小鼠注射100μl。
备注：本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象，抽入针管前应充分混匀，抽入针管后应尽快注射。
第21天按同样方式加强免0疫1针。
备注：每次佐剂和抗原现配现用。
第35天采微量尾血进行elisa测定，抗0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内，随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。
结 果
一、两种免0疫方式小鼠血0清效价比较
对两组试验动物在完成了基础免0疫后，尾静脉采集少量---，分离血0清，进行间接elisa测定抗0体效价，检测结果见图1。由图中数据可知，新的改良免0疫方法，在第二次免0疫后，抗0体效价即达到1：104。两组数据经生物学统计软件spss(windows 13．0版)进行t检验，统计结果差异极---(p(0．001)。
二、两种免0疫方式小鼠融合率比较
在细胞融合后约7～10 d可见孔内杂交瘤细胞生长，当细胞融合成片达孔底面积的35％～50％时，用elisa检测特---抗0体。两组免0疫小鼠细胞著。改良法耗费时间短，但获得的抗0体效价更高。
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