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e53333;>薄层层析硅胶板
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众所周知,传统色谱分离技术是采用固定的色谱塔进行,---入一定量物料,然后采用洗脱剂不断洗脱,在同一出口在不同时间段就可接到不同的产品组分,此过程明显费时费力;而连续色谱分离技术则是利用不同物质在由固定相和流动相构成的体系中具有不同的分配系数,当两相作相对运动时,这些物质随流动相一起运动,并在两相间进行反复多次的分配,从而使各物质达到分离。在实际生产中,连续流层析可获得更高的产量,且成本---,这是通过降低protein a 填料用量和缓冲液消耗量实现的,由于操作稳定,其可---地---产品的一致性,并---提高下游纯化的产量。传统色谱分离方式通常是单一色谱柱序列上样和洗脱,这就明显---了介质的利用程度,而连续色谱层析技术平行采用多根色谱柱平行上样和洗脱,这种连续上样的方式无疑能够 ffffff;>i
1.确定填料:先确认准备装填的填料,并根据填料粒径确定层析柱筛网。确定装柱流速和压力。
2.确定装柱规模:确定目标装柱体积,并计算所需层析柱的高度和内径。
3.确定装柱缓冲液。
4.准备对应的装柱泵或者层析系统。
对于一些较难装的填料,如ge sepharose hp, superdex pg 等,需要先恒流再恒压的方法。即排气完成后,以恒定流速压胶⒉小时,然后在固定压---胶45分钟后,记下此时柱床的高度。再将柱头压到此高度下3mm位置,装柱即完成。
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