人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒

上海莼试实业有限公司为您提供人碱性成纤维细胞生长因子elisa检测试剂盒。试验原理：
bfgf试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验elisa.已知bfgf浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将bfgf和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子elisa 检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的hrp。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物a、b，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中bfgf的浓度呈比例关系。

自备材料
1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。

安全性
1．避免直接接触终止液和底物a、b。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要吃喝、---或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项
1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4．使用---的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物a、b液时，避免使用带金属部分的加样器。
5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7．底物a应挥发，避免长时间打开盖子。底物b对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取od值。
8．加入试剂的顺序应一致，以---所有反应板孔温育的时间一样。
9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

人碱性成纤维细胞生长因子elisa 检测试剂盒样品收集、处理及保存方法
1、血清-----操作过程中避免任何细胞---。使用不含热原和内---的试管。收集---后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆-----edta、柠檬酸盐、---血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并---样品均匀地充分解冻。

试剂的准备
标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。

2．洗涤缓冲液50×的稀释：蒸馏水50倍稀释。

操作步骤
1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5．每孔加入80ul的亲和链酶素-hrp，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7．每孔加入底物a、b各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9．在450nm波长处测定各孔的od值。

局限
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到---的结果。

试剂盒性能
1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数r值为0.990。
2. 特---：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的od值

2、以吸光度od值为纵坐标y，相应的bfgf标准品浓度为横坐标x，做得相应的曲线，样品的bfgf含量可根据其od值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围：0-800pg/ml

4、敏感度： 1.0 pg/ml
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