深圳市耐思特科学仪器有限公司为您提供elisa试剂盒介绍。elisa试剂盒标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 nan3 的样品,因 nan3 抑制辣根-化物酶的hrp活性。
elisa试剂盒操作步骤:
1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同
2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50?l。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40?l,然后再加待测样品 10?l。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50?l,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
计算和结果判定:
试验有效性:阳性对照孔平均值***1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值cut off计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定:样品 od 值< 临界值cut off者为弓形虫抗体 igg(tox igg)阴性
阳性判定:样品 od 值*** 临界值cut off者为弓形虫抗体 igg(tox igg)阳性。
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