检测试剂盒详情

深圳市耐思特科学仪器有限公司为您提供检测试剂盒详情。检测试剂盒用户自备试剂：
　　1． 10mm tbsph7.2~7.4
　　- 7.6g
　　加蒸馏水 800ml，调 ph 值至 7.2~7.4，-定容至 1000ml
　　tbs-t：tbs+tween 200.05%体积比
　　2．抗原修复液依检测抗原不同而选择不同的修复液
　　10mm ph6.0 柠檬酸缓冲液
　　柠檬酸 0.38g
　　柠檬酸三钠 2.45g
　　加蒸馏水 900ml，调 ph 值至 6.0，-定容至 1000ml或：0.5m edta 修复液ph8.0
　　edta·2h2o 186.1g
　　柠檬酸三钠 2.45g加蒸馏水 700ml，用 10mm naoh 调 ph 值至 8.0，-定容至 1000ml
　　3. 缓冲甘油封固剂 10 ml
　　4. tween 20 5 ml石蜡包埋组织切片免疫染色
　　实验步骤建议方案 ：
　　石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度
　　1.烤片： 将待做切片置于切片架上，于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr；
　　2.脱蜡： 切片放入盛有容器中脱蜡 3 次即ⅰ、ⅱ、ⅲ，每次10 min；
　　3.水化： 切片经下行酒精水化；
　　4.抗原修复： 根据抗体说明书方法进行抗原修复，常采用高压、微波温度达到98~100℃或酶-修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddh2o 洗 2×2min，tbs 洗涤2×2min体修-法见附 1* 注：有些抗原勿需修复，
　　5 步封闭。5.封闭： 滴加试剂 b，37℃湿盒孵育 30 min；
　　6.加一抗：滴加用试剂 c即用型一抗，37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜；
　　7.洗涤： tbs-t 洗涤3×5 min；
　　8.封闭： 滴加试剂 b，37℃湿盒孵育 10 min；
　　9.加二抗： 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗试剂 d，37℃湿盒中孵育30 min；
　　10.洗涤： tbs-t 洗涤3×5 min；
　　11.封闭： 滴加试剂 tween 20，37℃湿盒孵育封闭 20 min；
　　12.加 hrp-sa： 滴加用抗体稀释液稀释的试剂 e1：50~200，终浓度 5~20 nm，37℃湿盒中孵育 30 min；
　　13.洗涤： tbs-t 洗涤3×5 min，tbs 洗涤2×5 min；
　　14.显色：应用 dab 溶液试剂 f显色；
　　15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明；
　　16.封片： 待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片；
　　17.观察成像： 显微镜下观察成像。
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