青岛艾普智能仪器有限公司为您提供小鼠elisa检测试剂盒。小鼠elisa检测试剂盒的简易说明书:
使用目的:本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中待测物质的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与hrp标记的抗原抗体结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过---洗涤后加底物tmb显色。tmb在hrp酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值,通过标准曲线计算样品中待测物质的浓度。
小鼠elisa检测试剂盒的操作步骤:
1、标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2、加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7、温育:操作同3。
8、洗涤:操作同5。
9、显色:每孔先加入显色剂a50μl,再加入显色剂b50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
10、终止:每孔加终止液50μl,终止反应。
11、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度od值。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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