北京博尔西科技有限公司为您提供蛋白g琼脂糖凝胶ff。提示:本公司全部产品均为科研实验使用试剂,非---用途、非食品、非体外诊断试剂,不可用于动物及人体!
蛋白g-琼脂糖凝胶ff
protein g berpharose ff
1.产品介绍
链球菌g蛋白streptococcus protein g,spg是g、c型链球菌细胞壁中的一种蛋白质,能特-地同免疫球蛋白igg分子的fc段结合而不影响其fab段与抗原分子结合的能力,其亲和填料可以用于从血清、腹水、组织培养物等上清中结合吸附并纯化免疫球蛋白抗体。
2.规格
1ml预装柱、5ml预装柱、10ml预装柱、25ml、100ml、500ml、1l
3.产品性能
性能 指标
基质 4%琼脂糖微球
配基 重组蛋白g
配基密度 >6mg/ml
载量 ***30mg 人igg/ml
粒径 45-165μm
---耐压 0.3mpa
---流速 50-300 cm/h
ph稳定范围 3-10
储存缓冲液 20%---
储存温度 4-8℃
4. igg与蛋白ag结合强度比较
种类 亚类 蛋白a 蛋白g 蛋白a蛋白g融合蛋白
人 igg1 +++ +++ +++
igg2 +++ +++ +++
igg3 + +++ +++
igg4 +++ +++ +++
igm + - +
igd - - -
iga + - +
fab + + +
兔 igg +++ ++ +++
山羊 igg1 + +++ +++
igg2 +++ +++ +++
牛 igg1 + +++ +++
igg2 +++ +++ +++
小鼠 igg1 + +++ ++
igg2a +++ +++ +++
igg2b +++ +++ +++
igg3 ++ +++ +++
igm - - -
大鼠 igg1 + ++ ++
igg2a - +++ +++
igg2b - + +
igg2c +++ +++ +++
猪 igg +++ ++ +++
犬 igg +++ + +++
鸡 igy - - -
马 iggab + ++ +
iggc + ++ +
5.纯化流程
应用举例:
结合缓冲液:20mm磷酸缓冲液、150mmnacl、ph7.0
洗脱缓冲液:0.1m甘氨酸,ph3.0或0.1m柠檬酸缓冲液,ph 4.0
中和缓冲液:1 m tris-hcl,ph 8.5
1) 1ml重组蛋白g琼脂糖凝胶预填柱,用5-10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液。
2)用结合缓冲液平衡5-10个柱床体积。
3)将5ml人多抗血清用结合缓冲液稀释至50ml,0.45μm滤膜过滤上样。
4)用结合缓冲液平衡5-10个柱床体积至基线。
5)用洗脱缓冲液洗脱抗体,收集洗脱峰,并用中和缓冲液调节其ph至中性。
6)每次使用后依次使用3个柱体积的结合缓冲液,5个柱体积的去离子水, 5 个柱体积的 20%的---平衡保存,防止填料被-污染。
7) sds-page电泳分析。
6.注意事项:
1)样品洗脱后一般ph很低,应---用碱性中和缓冲液如1mtris-hcl,ph8.5将收集到的抗体溶液中和到中性,或在收集容器中事先装5-10%、ph7.5的缓冲液如1mtris-hcl或1m磷酸缓冲液,以利于维持抗体的生物活性,避免抗体失活。
2)使用时---柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。
3)填料再生清洗:随着一些变性物质的沉淀和蛋白的-,往往造成流速和结合载量下降,-影响纯化效果,这时需要对填料进行再生清洗如下步骤
去除沉淀或变性物质:用 2 倍柱体积的 6m ---胍溶液进行清洗,然后立即用 5 倍柱体积的 pbs, ph 7.4 清洗。
去除疏水性吸附造成的非特-吸附物质:用 3-4 倍柱体积的 70%---或 2 倍柱体积的 1% triton x-100 清洗,然后然后立即用 5倍柱体积的 pbs, ph 7.4 清洗
4)本产品保存条件:20%---,4~8℃,2年。
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