STREP TACTIN琼脂糖凝胶FF

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北京博尔西科技有限公司为您提供strep tactin琼脂糖凝胶ff。提示:本公司全部产品均为科研实验使用试剂,非---用途、非食品、非体外诊断试剂,不可用于动物及人体!
strep-tactin琼脂糖凝胶ff
strep-tactin berpharose ff
1. 产品介绍
strep-tactin琼脂糖凝胶ff是一种将strep-tactin键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质,主要用于纯化strep ii标签蛋白。strep ii标签为8个---酸的小标签wshpqfek,由于标签小,仅为1kda左右,一般不影响融合后蛋白质的结构和功能,常用于融合表达蛋白质的检测和纯化。
本产品的配基strep-tactin是链霉亲和素streptavidin的突变体,与链霉亲和素相比,strep-tactin对strep ii标签的亲和能力至少强10倍以上,能够在温和的条件下与strep ii融合蛋白结合和解离。由于strep-tacin对strep ii标签具有高度特---,一般一步纯化就能获得高纯度的蛋白质样品。
strep ii标签蛋白与凝胶结合后可使用脱硫生物素竞争方式进行洗脱,该洗脱方式比较温和,一般不会影响蛋白质的性质。如蛋白质---受一定的碱,也可用碱液洗脱,比如10mm naoh等。strep-tactin琼脂糖凝胶ff---受较高的碱清洗,可以用0.5m naoh进行再生清洗和去除热源等。另外,2-(4-------唑)------haba也可用于凝胶再生,过量的haba能够竞争下脱硫生物素,并且在无haba的缓冲液中,能将凝胶上的haba洗脱。

2.规格
1ml预装柱、5ml预装柱、10ml预装柱、20ml、100ml、500ml

3.产品性能
性能 指标
基质 6%琼脂糖微球
配基 strep-tactin
配基密度 ***5mg/ml
载量 ***6mg/ml strep ii标签蛋白
粒径 45-165μm
流速/---流速 20-100/700 cm/h
耐反压 0.3mpa
ph稳定范围:短时间/长时间 2~13/4~11
储存缓冲液 20%---
储存温度 4-8℃

4.纯化流程
缓冲液
纯化strep ii标签蛋白
结合缓冲液:100mm tris-hcl,150mm nacl,1mm edta,ph8.0;
或20mm nah2po4,280mm nacl,6mm kcl,ph7.4
洗脱缓冲液:结合缓冲液+ 2.5mm脱硫生物素;或10mm naoh
再生缓冲液:0.5m naoh;
或结合缓冲液+1mm haba
样品准备
上柱的样品应尽量保持与结合缓冲液一致。通常可用透析、超滤、稀释等方法处
理样品。并且上柱前应过0.45μm滤膜或高速离心去除不溶物。
样品纯化
1平衡:取适量的strep-tactin琼脂糖凝胶ff装入合适的层析柱中,用蒸馏
水清洗5个柱体积去除保存液,再用结合缓冲液平衡5个柱体积,建议流速为100cm/h。
2上样:将准备好的样品上柱,建议流速为20-100cm/h,可根据实际结合情
况选择流速,能获得较好的---。
3再平衡:上样后用结合缓冲液平衡10个柱体积以上,或平衡至基线,洗去
杂质,流速为100cm/h。
4洗脱:用洗脱缓冲液洗10-20个柱体积,建议流速为100cm/h,收集的洗脱
液应立即调节ph至稳定范围,并根据需要置换缓冲液。
5naoh再生:洗脱目的蛋白后的柱子用蒸馏水清洗3-5个柱体积,并用0.5m
naoh再生3-5个柱体积,再用蒸馏水清洗至中性,用20%---保存柱子,或进行下一次纯化。
6haba再生:用脱硫生物素洗脱目的蛋白的,还可以用haba缓冲液再生,
一般用haba的结合缓冲液洗15个柱体积,再用结合缓冲液洗30个柱体积,然后可以用20%---保存柱子,或进行下一步纯化。haba上柱后凝胶颜色会变为红橙色,在结合缓冲液平衡后会恢复正常的白色,这种再生方式一般使用体积会大些。

5.注意事项:
1)使用时---柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化---。
2)本产品保存条件为20%---,4~8℃。
3) 2-25℃,常压,避光运输
4仅供科研实验使用
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