猪趋化素样因子超家族成员5ELISA试剂盒免费代测

样本实验前准备：
elisa试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1血清
室温---自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右2000-3000转/分。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
2血浆：
应根据标本的要求选择edta、柠檬酸钠或---作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右2000-3000转/分。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
3尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右2000-3000转/分。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右2000-3000转/分。仔细收集上清。
5培养细胞
检测细胞内的成份时，用pbsph7.2-7.4稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右2000-3000转/分。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
6组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的pbs，ph7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的pbsph7.4，或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右2000-3000转/分。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

注意事项：
1加样：
实验样本过多时，可分批次操作，以减少实验时间延长造成的误差；
加酶试剂后，用吸水纸吸干孔外试剂；
作定量试验时，使用加样器加注试剂，并经常校正其准确性，此外，要做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。
2.温育：
如有两种温度，尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件；
用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察；
96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”，因此尽量采用水浴；
3.洗板：
手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；
洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅，若被杂物堵塞时可用-针头挑出；
为了洗涤效果好，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次，或适当增加洗板的次数；

实验流程:

1.实验前标准品、试剂及样本的准备；
2.加样标准品及样本50μl，37℃孵育30分钟；
3.洗板5次，加酶标试剂50ul，37℃孵育半小时；
4.洗板5次；加入显色液a，b各50ul,37℃孵育显色15分钟
5.加终止液50μl，立即450nm读数。
6.计算

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