
产品全称:
英文简称:porcine efna1 (ephrin a1) elisa kit
货号:goy-p3582
规格:48t/98t
服务:可提供免费代测服务,以及产品说明书和技术指导等
保存环境:2-8℃低温、避光、防潮
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..需要而未提供
1进口抗体——---、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3---的优化方案——回收利用率高、---性强
4适用于---、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全:生长因子、---因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素,经过---洗涤后用底物tmb显色。tmb在---化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值,计算样品浓度。简易原理示意图如下:

1、酶联板assay plate :一块96孔或者48孔。
2、标准品standard:2瓶冻干品。
3、样品稀释液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根---化物酶标记亲和素稀释液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根---化物酶标记亲和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液wash buffer:1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
2酶标板置4℃,包被过夜。
3洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后,即甩去,之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
6洗板,同4。
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
9洗板,同4。
10每孔加tmb显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。
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