液相色谱分析柱的准备工作

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无锡安锐欣管道科技有限公司为您提供液相色谱分析柱的准备工作。液相色谱分析柱由柱管、压帽、卡套密封环、筛板滤片、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有---的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛光相同还有使用熔融硅或玻璃衬里的,用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板,是烧结不锈钢或钛合金,孔径0.2-20um(5-10um),取决于填料粒度,目的是防止填料漏出,柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流---确定,目的是为了避免管壁效应。
使用前的准备工作:
1、样品的前处理:
a、至好使用流动相溶解样品;
b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质;
c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。

2、流动相的配制:
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点:
a、流动相对样品具有一定的溶解能力,---样品组分不会沉淀在柱中;
b、流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应;
c、流动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命;
d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用uv检测器,至好使用对紫外吸收较低的溶剂配制;
e、流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡,导致实验无法进行;
f、在流动相配制好后,一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测,还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。

3、流动相流速的选择:
因液相色谱分析柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱,要追求至佳柱效,至好使用至佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。
当选用至佳流速时,分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间。
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