南京江苑生物科技有限公司为您提供293t,hek-293t,人胚肾细胞。细胞简介
人胚肾细胞株293插入sv40 t-抗原基因后产生的高转染效率的衍生株称为293t。该细胞初的名字293tsa1609neo,携带sv40序列,被广泛用于逆转录生产、基因表达和蛋白表达。
运输和保存
1.1 ml冻存管包装干冰运输,收货后-80℃冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏。若发现干冰已经挥发干净、冻存管盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2.t25瓶培养的细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
培养瓶细胞接收后的处理
1.收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁,拆下封口膜,放入37℃,5% co2培养箱中静置3-4 h,以稳定细胞状态。若发现培养瓶破损、有液体溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2.请在显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照,10倍和20倍各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后依据。
3.细胞收货脱落:293t细胞贴壁能力弱,收货如有大面积脱落的细胞团为正常现象。若细胞在快递运输途中因振动脱落,先将培养瓶放入37℃,5%co2培养箱中静置3-6 h,让少数脱落的细胞可再附着生长。若仍有脱落的细胞,则 (1) 收集所有细胞悬液,1000 rpm离心5 min,保留沉淀;(2) 添加胰蛋白酶液0.5 ml至离心管中,重悬沉淀,置于37℃1-2 min左右;(3) 向离心管内加入5 ml完全培养基终止;(4) 1000 rpm,离心5 min,丢弃上清,用5 ml完全培养基补加1-5% fbs,促进贴壁重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;(5) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
4.收货细胞的培养和传代:在显微镜下观察细胞生长状态,若细胞生长密度在60%以下,可去除培养瓶中的灌液培养基,加入新配制的完全培养基,置于培养箱中继续培养。若细胞生长密度达80%-90%以上,可以对细胞进行传代处理。
5.运输用的培养基灌液培养不能再用来培养细胞,请换用合适的新鲜培养基来培养细胞。
冻存细胞接收后的处理
收货后-80℃冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏。
细胞复苏:将含有1 ml细胞悬液的冻存管置于37℃水浴中迅速摇晃解冻,回温后喷以75 %酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。将冻存管中细胞加入到含4-6 ml完全培养基的离心管中混合均匀。1000 rpm离心3-5 min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入培养瓶/培养皿中,培养箱中孵育。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
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