植物-化物酶POD酶联免疫分析试剂盒操作步骤

植物---化物酶pod酶联免疫分析试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
24mu/l5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12mu/l4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6mu/l3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3mu/l2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5mu/l1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样：分别设空白孔空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl样品终稀释度为5倍。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂a50μl，再加入显色剂b50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应此时蓝色立转黄色。
11.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度od值。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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