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洋葱亚细胞定位培养电话 武汉思特进

发布者:武汉思特进科技发展有限公司  时间:2020-4-1 





武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的-公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、-、细胞等生物实验。



棕榈油酸(c16:1δ9)和顺式十八碳-(c18:1δ11)等ω-7脂肪酸具有重要的食品营养、保健与工业应用价值。本文构建了来自富含ω-7脂肪酸的猫爪藤(macfadyena ungui s-cati)acp-δ9脱氢酶基因(muc acp-δ9d)的植物组成型表达载体,农介导转化...



目的构建通用型植物gfp标签蛋白表达载体,研究蛋白质的细胞内定位对蛋白质组学和代谢组学等研究的意义。方法构建2种gfp标签蛋白质表达载体,分别在gfp的n和c端预留位点,以目的基因。利用该基因载体,分别内切酶fok i的切割结构域与ms2噬菌体外壳蛋白mcp的串联蛋白fok i:mcp:fok i,fmf至gfp的n和c端,得到fmf与gfp的融合蛋白gfp:fmf和fmf:gfp,其中fmf的n端带有细胞核定位信号。利用农介导植物瞬时表达侵染本氏和洋葱表皮细胞,观察gfp荧光表达情况。结果成功构建了2种融合了目的基因和gfp的表达载体p er35gfp-fmf和p er35fmf-gfp。激光共-结果显示侵染了只含gfp载体的农的细胞,可在细胞核和细胞质中检测到gfp的绿色荧光,而侵染了含核定位信号fmf:gfp和gfp:fmf 2种融合蛋白载体的农的细胞,只在细胞核中观察到绿色荧光。结论该载体系统可运用于研究蛋白质在植物细胞中的亚细胞定位,具有简单、和通用性的特点。



几丁质酶(chitinase)是一种能够将几丁质水解成n----葡糖胺的糖苷酶,广泛存在于植物细胞中,是----反应体系的重要组成部分.该文深入分析了1种三七几丁质酶基因pnchi1的功能.构建pnchi1的亚细胞定位载体,转入洋葱表皮细胞中瞬时表达,在激光扫描共-显微镜下发现pnchi1定位于细胞壁中.构建pnchi1的原核表达载体,-并纯化获得重组蛋白,体外平板---实验结果显示pnchi1原核重组蛋白对尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌、轮枝镰刀菌3种三七根腐病菌的菌丝生长具有很强的抑制活性.采用反向遗传学技术验证pnchi1的功能,通过根癌农介导将pnchi1转入中过量表达.qrt-pcr分析结果表明pnchi1在t2代---中大量表达,同时叶片接种实验显示pnchi1---对茄腐镰刀菌的抗性增强明显.结论:pnchi1是定位于细胞壁的几丁质酶,体外能抑制几种三七根腐病-,在过表达大大提高了对茄腐镰刀菌的抗性,推测pnchi1是三七中参与根腐病---反应的重要抗病基因.



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