小鼠心肌细胞HL-1

小鼠心肌细胞hl-1
 
  1、您收到hl-1小鼠心肌细胞后，请按照以下方法进行操作：
 
  取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%co2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
 
  2、细胞传代：
 
  1细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用pbs清洗细胞一次；
 
  2添加0.25%胰蛋白酶---液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止---，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
 
  3弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，---放入37℃，5%co2细胞培养箱中培养；
 
  4待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
 
  3、细胞冻存：
 
  1细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用pbs清洗细胞一次；
 
  2添加0.25%胰蛋白酶---液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止---，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
 
  3用适量的冻存液fbs：dmso=9：1重悬细胞，并放置于冻存管中；
 
  4先将细胞冻存管放置于-20℃1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
 
  详情：
 
 
 
  上海雅吉生物科技有限公司
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