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据介绍，该发明公开了一种非洲猪瘟--- cp530r 基因的荧光 pcr 检测试剂及其制备方法与用途，设计合成了一套特---的引物及 taqman 探针和阳性对照，并利用该引物及探针建立了一种快速简便、特---强、灵敏度高的荧光 pcr 检测体系，可在 3～4 小时内从被检样本中快速、准确、特异、安全、简便地检出 asfv cp530r 基因，可用于来自家猪、---和软蜱的各种样本中微量非洲猪瘟---cp530r 基因的检测。sybr仅与双链dna进行结合，因此可以通过溶解曲线，确定pcr反应是否特异。

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非洲猪瘟 ( asf ) 是由非洲猪瘟--- ( asfv ) 引起猪的一种---、热性、高度接触性传i染病。从 20 世纪 60 和 70 年代i开始 asf 由非洲蔓延至欧美地区，2007 年格鲁吉亚、亚美尼亚、阿塞拜疆和俄罗斯都出现了大面积流行，2018年8月也开始在我国快速蔓延开来，对我国养猪业的持续稳定发展构成-威胁。因此，本方法为快速诊断非洲猪瘟---，提供了有力的技术手段。环境监测在人类食品和宠物食品行业已经成为常规举措，可以帮助人们发现生物安全计划中的薄弱环节。

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非洲猪瘟---的附着力-？直接接触或者携带---的物品再次传播的能力-？尚不清晰。目前已知非洲猪瘟是高度接触性传播的---、烈性i---，主要通过接触或采食受非洲猪瘟---污染的物品，以及通过昆虫吸血而传i染。短距离可经空气传播、污染的饲料、泔水、剩菜及肉屑、栏舍、车辆、器具和衣服等均可间接传播本病。而且目前-asfv对外界的抵抗力强，在自然条件下可以长时间保持感i染性，可以在-、粪便和各种组织中长期保持感i染性。3目前real-timeq-pcr实验成本比较高，从而也---了其广泛的应用。含有---的-是该病发生传播的重要因素。

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非洲猪瘟african swine fever，asf是由非洲猪瘟---african swine fever virus，asfv引起的一种---、烈性、高度接触性传i染病，致死率100%。自2018年8月宁省沈阳市发生第i一起非洲猪瘟i---起，目前全国已有29个省115个地方发生非洲猪瘟i---，已扑杀数百万头生猪，直接---数百亿元。在荧光背景信号阶段，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化。目前全都没有有效的非洲猪瘟i疫i苗进行预防，现在有效的-方法仍然是对非洲猪瘟---进行检测，根据检测结果，对发生---的地方严防死守，对疫点地区生猪全部扑杀，进行无害化处理，防止---的扩散。

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相对定量可以对每个样本中模版的其实水平之间的差异进行精i确比较，没-知道模版的确切拷贝数，并且样本模板中的相对水平不用使用标准曲线就可以确定。相对定量分析以实时pcr方式执行，在实时pcr分析过程中，pcr基因扩增一直在监控中，在pcr进行期间进行数据采集，而不是在pcr结束时终点pcr才获取数据。广州劢博--博日全自动-提取纯化系统现有数据表明，在猪日粮中，猪流行性------和其他外来---等能-存活的原料包括：豆粕、酒糟、猪源蛋白质、-预混料、氨化胆i碱、l-赖氨酸和dl-蛋氨酸。在实时pcr中，反应是在目标的扩增早被监测到时用循环中的时间点来描述的，而不是在pcr结束时通过目标的累计数来描述。

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在pcr反应体系中，加入过量sybr荧光染料，sybr荧光染料非特---地掺入dna双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的sybr染料分子不会发射任何荧光信号，从而-荧光信号的增加与pcr产物的增加完全同步。sybr仅与双链dna进行结合，因此可以通过溶解曲线，确定pcr反应是否特异。金开瑞采用sybr荧光染料法及taqman探针法进行荧光定量pcr检测，从引物设计到检测-完成，提供2种常用的内参引物及免费的数据分析，每个样品设置至少三个平行对照，-结果的准确-。

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