干细胞培养分化步骤

干细胞培养分化步骤：
1、1×pbs洗细胞并留少许pbs在培养皿内；
      2、用细胞刮刀收集细胞；
      3、将细胞转入15ml 离心管管内并离心3分钟；
      4、弃去上清并将细胞重悬于冷的冻存液中10 cm的培养皿用2ml，15cm的培养皿用6－7ml。
      5、分装于冻存管内，每管1ml；
      6、置－80℃过夜，第二天移入液氮。
geltin明胶包被
准备500ml 0.1％geltin溶液
1、将0.5 g明胶溶解在500ml无钙镁的pbs中50－65℃水浴15～30分钟。
      2、zui好在溶液没有冷却的情况下通过0.22 μm滤膜过滤，贮存在4℃。
包被培养板或培养皿
1、加入足量的明胶溶液覆盖培养平面15 cm培养皿加2ml，10 cm培养皿加0.5～1 ml，溶液的量并不重要，只要能完全覆盖培养表面就行了。；
      2、置室温30分钟；
      3、去除明胶溶液，将培养板贮存在包装袋中室温放置，zui好将板子平

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