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  关于抗体的选择

蛋白特---：针 对需要检测的蛋白查找抗体，几个细节要区分，重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测，对抗体的要求是不一样的，注意查看抗体说明书的检测说明。如果重组蛋白不 是全长表达，则需要注意抗体的免yi原区域是否在重组蛋白区域内。内源性蛋白能清楚其剪切与修饰的方式，特殊表型的蛋白需要进行序列比对，并结合抗体免 yi原序列，查看交叉反应的情况。磷酸化蛋白检测需要确定具---点，不同位点的磷酸化意味着可能有不同的机制存在，不宜一概而论。

怎样选择适合你实验需要的抗体？

1样本蛋白的结构性质。了解样本蛋白的结构性质有助于选择zui合适的抗体，待测样本蛋白的结构域和样本在提取和处理过程中是否会变性，蛋白空间构象的改变，会影响抗体的免yi亲和反应。

2单多ke隆抗体的选择。市面上的抗体还是以多ke隆抗体为主，一般单ke隆抗体特---强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多ke隆抗体特---稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现非特---染色可以通过封闭等避免。