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小鼠xiao喘模型
造模方法
致敏:小鼠在清洁级实验动物房适应性饲养1周,于造模当天、第8天经腹腔无菌注射抗原液0.2 ml
激发:第二周,每日上午8~10时将小鼠置于自制密闭雾化箱中,给予含10mg/ml卵清蛋白溶液超声雾化吸入(现配现用),每日1次,每次30min以激发xiao喘,连续激发14-21 d。成功的模型表现:小鼠出现烦躁不安,进而呼吸加快、加深,静伏不动、弓背,---者伸颈、缩胸、收缩呈喘xi状,甚至大小便---等。
造模照片
模型图片
小鼠关节yan模型
根据tong风性关节yan发生的特点,模型构建一般采用踝关节或膝关节注射尿酸钠msu的方法。尿酸钠是一种白色略带黄色的粉末,在体内常沉积于关节和shen脏中,被认为和tong风性关节yan的发病有关,通过注射尿酸钠可认为模拟关节损伤过程,造成关节yan症。
step2:将25mg/ml的尿酸钠乳浊液注射到大鼠踝关节腔处
step3:轻轻活动大鼠踝关节使yao物均匀分布在关节腔中
step4:实验过程中观察大鼠步态,测量踝关节周长
step5:实验结束后处死大鼠,取踝关节软gu做进一步检测
tang尿病模型
tang尿病构建
一般tang尿病模型构建的方法有:自发突变,饮食-,化学-,手术-,---/基因敲除等。此方法为饮食-+化学试剂-,一般是用stz加高脂高糖的膳食-来构建tang尿病模型模型。stz即链脲佐菌素streptozocin简称,是一种小片状或者棱柱状结晶体,能溶于水。因其对一定种类的动物的胰岛β细胞有选择性破坏作用,能诱发许多动物的tang尿病,所以一般用它来构建糖tang尿病模型。
实验方法
step1:用高脂肪高糖的膳食饲喂小鼠,-出---,持续约4-6周;
step2:注射stz溶液:术前禁食12小时,之后进行给药处理;
step3:一段时间以后取血,用血糖yi检测小鼠的禁食12h的血糖浓度;
step4:血糖浓度***16.7mmol/l时判断建模成功,称量体重。
前lie腺素e2对大鼠巨噬细胞株nr8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响
方法:分别采用0.1 nmol/l pge2、1 nmol/l pge2、1 nmol/l pge2+10 nmol/l ep2受体抑zhi剂ah6809+10 nmol/l ep4受体抑zhi剂ah23848 处理的nr8383 细胞作为各实验组,选择未经pge2以及其特---受体抑zhi剂处理的nr8383 细胞作为对照组,采用western blot 和qpcr方法检测各组nr8383细胞内vegf蛋白以及mrna的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别---1huvecs,运用transwell 小室、matrigel 胶细胞成管实验等实验方法,观察pge2调控巨噬细胞对huvec 迁移效应和成管能力的影响。
结果:随着nr8383 细胞培养液中加入pge2浓度增gao,其 vegf蛋白表达和vegf mrna的表达水平---升高p<0.05;0.1 nmol/l、1 nmol/l pge2处理过的nr8383细胞培养上清液可以---增加huvec细胞形成的小管面积,形成小管面积随着pge2处理浓度的增加而增加p<0.05;huvecs的迁移运动也随着pge2处理浓度的升高不同程度的增强,huvecs趋化的数量---升高p<0.05;研究发现pge2特---的ep2/ep4 受体拮抗剂ah6809/ah23848,可以---抑制pge2 增强nr8383 细胞内vegf mrnas 表达的作用并且也---抑制pge2 增强 nr8383细胞促进huvecs成管和趋化能力的效应p<0.05。
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