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此方法是很常用的,广泛适用于---、酵母菌和霉菌等大多数微生物菌种的短期保藏及不宜用冷冻干燥保藏的菌种。
此方法的缺点是菌株仍有一定程度的代谢活动能力,保藏期短,传代次数多,菌种较容易发生变异和被污染。
正常情况下的保菌期:霉菌和有芽孢的---一般可保存6个月左右,无芽孢的---可保存1个月左右,酵母菌可保存3个月左右。
耐低温菌种的中试设备,冰下水温适用于3.5度保持在5度左右,cod、氮和磷的去除率依然非常高,经连续取样检测,污水中的cod、总磷和氨氮的降解率分别达 67%、56%和70%.中试非常成功。经中试验证:耐低温菌种,在水温3.5度时,微生物活性依旧非常高,各项指标去除率都达到50%以上,是中温微生物-的。
一培养基保存法
利用各种斜面和半固体培养基,加上石蜡油保存菌种,是一种简易的保存方法。
1.普通琼脂斜面保存法:肠道菌、等一般---可接种于不含糖的普通琼脂斜面上,斜面底部应加少许无糖肉膏汤,以防干涸。经35℃培养18~24h后,移种于4℃冰箱中,一般可保存一个月,每月传代一次。
2.-琼脂斜面保存法:链球菌、应接种于-琼脂斜面上,35℃培养生长后,置4℃冰箱中保存,链球菌须半个月至1个月移种一次,新分离菌株须2~4天移种一次,以后逐渐延长移种时间,在适应后可延至半个月移种一次。
3.巧克力色斜面保存法:宜保存菌,并在35℃孵箱中保存,一般每2天移种一次。
4.鸡蛋斜面保存法:适于保存含有vi抗原的沙门菌属及其他含表面抗原的---,一般可保存一个月。
5.半固体穿刺保存法:将---接种于琼脂半固体或琼脂半固体内,经35℃培养18~24h,再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。高度约lcm,置4℃冰箱保存。保存时间可达3~6个月。
二干燥保存法
原理是将---体内的水分蒸发掉,使其处于休眠和代谢停滞状态,从而达到长期保存菌种的目的医|学教|育网搜集整理。菌种干燥后低温保存,可保存数年至十几年。
三冷冻干燥保存法
本法又称冷冻真空干燥法。它综合利用了各种有利于菌种保存的因素低温、干燥和缺氧等,是目前有效的菌种保存方法之一。用本法保存的菌种具有成活率高,变---小等优点,保存期一般3~5年,有的可长达10年以上。
四脱脂牛奶保存法
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先将所需的种------采集回来,选取新鲜、个体大、壮实、中龄及无病虫害的子实体或菌核、菌索,作为分离用的材料。若为子实体,取其菌盖或菌柄组织;若为菌核,取其全部或部分如茯苓菌核;若为菌索,取其部分根状菌索如蜜环菌。再用0.1 %或75 %酒精进行表面消毒2 分钟,用无菌水或冷开水冲洗数次,洗净残留的药液后切成小块。,然后,放入pda 培养基的试管或培养皿上,置24 ~26℃温度下,培养5 ~ 7 天。在分离的---组织周围见长有白色菌丝时,应及时将菌丝移至斜面试管培养基上,再置温度24 ~26 ℃下培养7~10 天,即得纯菌种。所得的纯菌种还可继续扩大培养或保藏。
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