疏水层析介质承诺守信「在线咨询」
---相对于宏观物质甚至与---相比都是极其微小的生物体,但与传统蛋白及-生物分子相比,其尺寸又大很多,结构也复杂得多。---结构通常由蛋白质组成外衣壳,由-组成内芯,因此比蛋白和-分子都要复杂很多。---尺寸一般在20-100纳米之间,而---尺寸一般在1000纳米以上,蛋白分子尺寸往往在10纳米以下。人们只能借助电子显微镜才能看到---的结构和形貌。虽然多肽,蛋白,-等生物大分子都有成熟的分离纯化方法,但---到目前也没有一个比较理想的分离方法。
层析介质功能基团对生物分离性能的影响
功能基团的物理和化学性能是影响层析介质与目标分子的作用的主要因素,主要决定了生物分离模式并影响其分离的选择性和载量,因此选择合适功能配基及密度尤其重要。另外配基与基球表面距离也会影响其介质的分离性能,配基与基球表面距离可以通过链接配基和基球的手臂分子来调节。
---分离纯化的挑战与解决方案
---结构通常由蛋白质为衣壳及-为内芯组成,其尺寸在20-100纳米之间,与单一蛋白或-生物分子相比其结构复杂得多,分子量也大很多。因此用于蛋白分离纯化的层析介质很难满足---的分离纯化的要求。主要原因是---尺寸大,而传统蛋白分离纯化的介质孔径小,因此---在传统层析介质的扩散速度慢,---在常规蛋白层析介质上的吸附只限于外表面一薄层区域,导致载量低,并使得---在操作中大量失活。为了满足---分离纯化需求,纳微开发出三种---分离纯化介质及解决方案,分别为---孔单分散聚合物层析介质用于---分离纯化;小粒径无孔层析介质分离纯化---;孔径均一的整体柱分离纯化---。
孔径均一的整体柱用于分离纯化---
目前所使用的大部分层析柱都是填充柱,即将做好的微球介质填充到柱管中。这种用微球介质填充的层析柱容易放大,稳定,重复性好等优点,已被广泛地用于生物制药分离纯化,如抗
整体柱制备方法是把单体和致孔剂混合液填充到柱子中,经过升温产生聚合反应,在反应过程利用相分离原理形成贯穿孔结构整体柱,由于整个柱子是一个整体,可以保持较高的孔隙率和较高的机械强度。由于整体柱的孔隙率大, 可以减小流动相阻力和路径扩散, 提高可及比表面积及---吸附载量,从而提高---的分离效率。整体柱层析已被证明是---及---类大分子比较理想的分离方法。但目前整体柱制备方法有很大的局限性,因为在整体柱合成过程中,其孔径大小是通过反应过程中相分离来决定的,而相分离容易受到温度,反应速度等影响,因此孔径大小不容易控制,导致柱间批次的稳定性和重复性差,而且不容易制备能满足生产需求的大尺寸整体柱。这些因素是整体柱不能广泛用于---的分离纯化的主要原因。
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