PCR实验室-【英瀚斯】

单核苷酸多态性( snp )实验

snp (single nucleotide polymorphisn即单核苷酸多态性 ,是由于单个核苷酸改变而导致的---序列多态性(polymorphism)。据估计,在人类基因组中,大约每千个碱基中有一个snp ,无论是比较于度多态性(rflp)分析还是微标记(str) ,都要广泛得多。microrna芯片:rna干扰(rnainterference,rnai)现象是一种进化上保守的抵御---或外来---qin犯的防御机制。

实验方法原理:

snp (single nucleotide polymorphisn即单核苷酸多态性,是由于单个核苷酸改变而导致的---序列多态性(polymorphism)。据估计,在人类基因组中,大约每千个碱基中有一个snp ,无论是比较于---性段长度多态性(rflp)分析还是微标记(str) ,都要广泛得多。snp是我们考察遗传变异的单位,据估计,人类的所有群体中大约存在一千万个snp位点。-般认为,相邻的snps倾向于一起遗传给后代。 于是,我们把位于染色体上某一区域的一组相关联的snp等位位点称作单体型( haplotype b大多数染色体区域只有少数几个常见的单体型(每个具有至少5%的频率),它们代表了一个群体中人与人之间的大部分多态性。据估计,在人类基因组中,大约每千个碱基中有一个snp,无论是比较于度多态性(rflp)分析还是微标记(str),都要广泛得多。-个染色体区域可以有很多snp位点,但是我们一-旦掌握了这个区域的单体型,就可以只使用少数几个标签snps(tagsnp)来进行基因分型,获取大部分的遗传多态模式。

str检测

短串联重复(short tandem repeats, str)，又称微wei星dna(microsatellite dna)或简单重复序列(--- repeat sequence, srs或ssr)，是广泛存在于原核生物和真核生物基因组中的核苷酸重复序列。加入酶反应的底物，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。有丝分裂过程中dna链之间的错配引起的fu制滑动被认为是导致str产生的较为常见原因，并且依据不同fu制单元大小的不同以及不同物种之间，fu制滑动发生的概率也不相同。

str是以---序列 (core repeat units) 首尾相连多次重复形成。高l效毛细管电泳法(high-performancecapillaryelectrophoresis,hpce)这是一-种利用窄孔熔融石英毛细管来从复合物中分离不同化学组分的技术。每个str的---序列结构相同，长度为2-6bp，但其重复单位数目和重复区域的长度不同，因此str在不同种族、不同人群之间的分布具有差---，构成了str遗传多态性。不同个体之间在一个同源str位点的重复次数也不同，因而同指纹识别一样，str位点分析也可对个体进行身份识别。通过识别个体基因组在特定位点的特定序列重复，即可创建其基因档案。基于此，str分析法已经成为一种重要的鉴定分析方法，应用于---学、qin子鉴定及细胞鉴定等领域。

蛋白质质谱鉴定服务

蛋白质protein是有机大分子，是构成细胞的基本有机物和生命活动的主要承担者。3-94《---------食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》(二)原商检局制订的行业标准，等效采用美国fda的标准方法，用于对出口食品中的大肠进行检测。蛋白质在催化生命体内各种反应进行、---、抵御外来物质入l侵及控制遗传信息等方面都起着重要的作用。蛋白质的一级结构是---酸序列，通过鉴定---酸序列来匹配它的蛋白质，这是定性研究，是蛋白质组学的基础，也是蛋白质组学的重要技术之一。

质谱一般由离子源、分析器mass ---yzer和离子检测器detector三部分组成。-般:在93°c预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93°c40s***58°c30s***72°c60s,循环30-35次，后在72°c保温7min。传统的质谱仅用于小分子挥发物质的分析，但随着新的离子化技术的出现，如基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(maldi-tof)和电喷雾电离质谱(esi-ms)等，质谱技术的出现为蛋白质分析提供了一种新的途径。现在蛋白质组学基本研究手段是：以生物质谱技术为---，对蛋白质进行-、高通量分离、鉴定和分析。

蛋白质质谱鉴定的基本原理是用蛋白酶将蛋白质---成肽段混合物，经maildi或esi等软电离手段将其离子化，然后通过分析器将具有特定质核比的肽段离子分离开来。lncrna和mrna同时检测：芯片上包含有的lncrna和新的mrna序列检测探针。通过实际谱图和理论上蛋白质经过蛋白酶---后产生的一级质谱峰图和二级质谱峰图进行的比对，进行蛋白鉴定。