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elisa试剂盒的测定原理

测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应，所以任何的诊断剂离不开好的原料，如抗原抗体，酶等。以前用于测定的抗原通常为各种纯化抗原，而抗体则为纯化抗原动物后获得的多抗体和使用杂交瘤技术得到的抗体，而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来，随着分子生物学的发展，使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等测定试剂几成为现实的新一代试剂，各种新型使用的测定方法也不断出现。

elisa试剂盒的操作方法——间接法

以下是北京中检维康生物技术有限公司为您一起分享的内容，北京中检维康生物技术有限公司供应elisa试剂盒，欢迎新老客户莅临。

1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；

2.次日洗涤3次；

3.加一定稀释的待检样品未知抗体0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；

4.同时---白、阴性及阳性孔对照于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体抗抗体0.1ml；

5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；

6.然后用ddw洗涤。

其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

elisa试剂盒——会出现的问题及解决办法

1. 加入反应终止液后，没有吸光值或吸光值偏低。

a.原因：未加入酶标记物。

解决办法：请按照操作步骤进行。

b.原因：试剂盒内容物未能充分回。

解决办法：确定试剂盒内容物回温后再进行操作。

c.原因：室温太低。

解决办法：若室温太低(<19℃)，请于操作步骤4，适当延长温育时间。

d.原因：未使用试剂盒的清洗液清洗。

解决办法： 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。

e.原因：试剂盒已过有效期限。

解决办法：请更换成仍在有效期限内的试剂盒。