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试剂制备

1x assay/lysis buffer：实验前用去离子水将5x的assay/lysis缓冲液稀释成1x的缓冲液，并在使用前加入蛋白酶抑制l剂如1 mm pmsf, 10 μg/ml leupeptin亮肽素，或 10 μg/ml aprotinin抑肽酶。

样品处理

贴壁细胞

1. 培养细胞密度达到大约80%-90%之间直径10 cm培养皿，~107个细胞，并用活性剂或抑制l剂进行处理。

2. 吸去培养基并用冰冷的pbs洗涤两次。

3. 向细胞中加入1x assay/lysis缓冲液每个直径10cm的组织培养皿中加入0.5-1ml。

4. 将培养皿放置于冰上处理10-20分钟。

5. 用细胞刮棒把细胞从培养皿下分离下来。

6. 将细胞裂解物转入合适的管中并放置于冰上。

7. 如果核发生裂解，细胞裂解物可能会变得非常的粘稠并且难以吸取。当这种情况出现时，将细胞裂解物用27?的注射l器针头来回吸取3-4次，以破坏基因组dna，从而避免上述情况的出现。

8. 4°c 12000 g, 离心10 min。

9. 收集上清~1-2 mg总蛋白并放置于冰上使用。如果样品不立即使用，请将处理后的样品存放于-70°c条件下。

武汉纽斯特生物科技有限公司wuhanneweastbiotechonologyco.ltd，系美国生命科学试剂供应商美国neweastbio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国neweastbio---于生命科学和生物技术领域，主要产品有小分子、elisa试剂盒、蛋白等，与---高校和研究所、---大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系，产品销往全球。武汉纽斯特生物将携手美国neweastbio，负责美国品牌neweastbio产品在中国市场的推广、销售及售后服务。

测定原理

neweast biosciences rab35激l活检测试剂盒基于特定于配置的抗rab35 gtp

单克l隆抗l体，用于测量细胞提取物中或体外的活性rab35 gtp水平

gtpγs加载rab35激l活测定。 简而言之，抗活性rab35小鼠单克l隆抗l体将是

与含有rab35-gtp的细胞裂解液一起孵育。 绑定的活动rab35随后将被下拉

蛋白质a / g琼脂糖。 沉淀的活性rab35将通过免l疫印迹分析使用

抗rab35兔多克l隆抗l体。

产品描述

arf样蛋白1arl1是调节性gtpase家族中的一员，位于ras中gtpases的超家族，在真核生物中具有高度保守的同源基因。arl1---用于果蝇和秀丽隐杆线虫的早期胚胎发育。arl1在一级序列，细胞位置和功能膜交通的调节到arf1–6甚至共享几个共同的有约束力的合作伙伴。除了在膜交通中的作用高尔基/跨高尔基网络，有---表明arl1可能在离子稳态中起作用酵母。