阳江硅胶固相萃取柱分类择优「硕谱生物」

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什么固时候脱水？

激1活平衡溶液，上样液体无需抽干

其主要目的有两个，一个是清洗填料，洗去填料内部的底面，另一个是促进键合分子的展开。在某些长链的---团中，如c18在干燥填料中不能完全展开，而活化可使填料---团湿润伸展，使其对目标化合物保持较大吸附活性。因此，激1活平衡过程并不需要进行抽水。

淋巴1结需抽干主要有两个原因：

一般淋洗液与洗脱液的极性差异会很大(如淋洗液为水，洗脱溶剂为正---或---甲1烷)，两种溶剂不能互溶或溶解，从而造成洗脱液流不下或流速慢，妨碍洗脱溶剂与目标物接触，洗脱效果差，回收率低。

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所分析的目标化合物必须具有下列一种或多种功能基团，才能通过离子作用力从样品溶液中分离出来。

(1)可产生阳离子(带正电荷)的功能(2)可产生阴离子(带负电荷)的功能

此外，所分析的目标化合物必须在一定 ph条件下才能发生离子化或中性化反应。为了有效地利用离子交换机理在 spe柱中吸附目标化合物，需要满足两个条件：

目标化合物中的离子与吸附剂基团中的离子态带相反电荷；

(2)萃取环境中的 ph必须使目标化合物和吸附物上的功能基团同时带电；

(3)萃取环境中不得含有高浓度的竞争化合物，其电荷与目标化合物相同。

实践中，为了满足前两个条件，以---99%以上的目标化合物和固相萃取吸附剂表面的---团可以呈离子型或中性型，应根据样品或 spe柱吸附剂---团的 pka值来调整 ph值。

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洗涤剂和洗脱剂的优选

反相型和正相型洗脱液的洗脱强度应分别增加和降低，但对回收率无明显影响；

就反相模式而言，可先对目标化合物的水溶液上样，然后以5%、10%、20%、30%、40%、50%、70%、80%、90%、的甲1醇水溶液进行洗脱，分别收集洗脱液分析，建立淋洗曲线，确定目标化合物被洗脱时的溶剂体系，淋洗液中甲1醇的含量应略低于目标化合物正好被洗脱时的溶剂体系，而洗脱液中甲1醇的含量应略高于目标化合物正好被完全洗脱时的溶剂体系；当纯甲1醇无法洗脱目标化合物时，则应测试甲1醇-甲1基---1醚混合溶液的洗脱曲线；如果离子型化合物既不溶于水也不溶于甲1醇，则可在溶剂体系中添加酸或碱。

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净水系统

键合相位是非极性的，碰到水c18链就会被排斥，导致c18 “倒伏”，色谱峰变差，保留变弱，即水相位降，所以大多数c18反相分离柱不能用纯水作流动相。一般选用c18-aq反相柱分离亲水化合物，走水体系，提高保留值。

防腐盐

单独用酸或碱来调节流动相中的 ph值，由于分离成分的多样性，未必能达到实验所要求的效果。一般做法是：以缓冲盐制备流动相。但是有些缓冲盐会析出不易观察的微晶：过滤后，改变流动相的组成；不过滤时，晶体会损坏管柱，也容易堵塞管道，污染检测器。所以，在满足实验条件的情况下，尽量选择不容易析出的缓冲盐，分离结束后，一定要清洗柱子和整个分离系统，避免出现色谱性霉菌。为便于制备和处理，常选用挥发性盐类，如铵盐等。

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---小柱活化平衡的目的有二，一是使---团填料的粘附性和伸缩性保持对目标化合物的大吸附活性，另一种目的是去除填料本身可能引入的杂质。硅胶键合c18，是一种在硅胶微球表面粘结的疏水性c18---团，为使其对目标物保持充分吸附活性，需要在湿润环境上样物在填料表层形成的液膜(活化平衡)与上样物的溶剂分子具有---的相容性，目标物在膜间进行传质，与胶接c18发生疏水作用时，目标物与胶接c18本身并不具有水浸润性，直接上样物，c18蜷缩，而较强的疏水性则使其难以与目标物中的目标物分子充分接触，因此， hlb小柱采用聚合物改性材料，增加了亲水基团，使其在上样物的环境中与目标物分子充分接触，而发生传质，使目标物在上样物的环境中完全保留。

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反相萃取通常用于化合物的预处理，正如反相色谱是色谱中常用的分离方法一样，反相萃取中的淋洗液通常是一种水相或含水的缓冲溶液，除去水分后，可方便地进行干燥、浓缩。

有些项目，在淋洗步骤完成后，直接用一定量的洗脱液，如1 ml洗脱，这个过程中洗脱和定容集是一步处理，---步处理必然会影响洗脱步骤的定量结果。

也就是溶剂互溶问题，当淋洗过程中使用的溶剂极性与洗脱溶剂极性的差别较大时，就会产化分层，洗脱阻力大，洗脱液容易被稀释等问题，造成洗脱效果不同，从而导致试验结果。