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细胞复苏

将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中，加入10ml预热的dmem完全培养基，轻轻吹匀，离心，2000rpmx2min，弃上清液。

加入10ml dmem培养基清洗，弃上清液。加入10ml dmem完全培养基，轻轻吹打，接种于10cm盘中，在含5%co2的细胞培养箱中培养。

细胞传代

细胞密度达到80%~90%时．去培养基，10ml pbs清洗2次。加入3ml含0．25%edta的胰蛋白酶，放人细胞培养箱3min。加人1ml dmem完全培养基终止胰酶---，转移至15ml离心管。

加入10ml pbs清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmx2min，弃上清液。再加入10ml pbs经高压灭菌，保存于40c，吹匀，吸取10微升进行计数，按照1×106/盘接种，在含5%co2的细胞培养箱继续培养。

ips研究方向

1．解析-体细胞重编程为ips细胞的分子机制

2．研究 ips细胞生物学特性和行为(如自我copy、增殖和分化等)调控的机制及ips细胞体外定向-分化机制

3．提高ips细胞制备效率

4．充分评价ips细胞---应用的安全性

5．建立有效、安全、实用制备人ips细胞的方法，即在阐明体细胞重编程为ips细胞机制的基础上建立无遗传修饰的ips细胞制备策略与方法(如仅利用一些小分子物质即将人的细胞重编程为ips细胞)

6．在---项研究的基础上，探索一条简便制备“个体特异的”或“---特异的”治1疗型人ips细胞的技术路线和方法