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色谱分析的目的
分析色谱的目的,是分析出混合物中一个或者几个纯物质的含量;制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动相。然而,当色谱柱上样品负载加大的时候,往往导致柱效急剧下降而得不到纯的产品。制备色谱,要解决容量与柱子效果之间的矛盾,对重现性也要考虑。从经济上来说。制备色谱要争取少用填料,少用溶剂,要尽可能多的得到产品。
2、开仪器电源开关,一般先上后下,下为检测器开关;
3、检查流动相是否够,仪器上记录的溶剂量时候正确;
4、开电脑;
5、打开仪器联机软件进入界面,---启动设置泵流速为10,此时仪器中应该有液体流出;
6、---平衡然后---每个波长和调整冲一段时间,待压力稳定后可以进样。
1气相色谱不适用于不挥发物质和对热不稳定物质,而液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的---。有些样品因为难以汽化而不能通过柱子,热不稳定的物质受热会发生分解,也不适用于气相色谱法。这使气相色谱法的使用范围受到了---。据统计,目前气相色谱法所能分析的有机物,只占全部有机物的15%~20%。另一方面,液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的---。所以液相色谱非常适合于分离生物、医学有关的大分子和离子型化合物,不稳定的天然产物,种类繁多的其它高分子及不稳定的化合物。
2对于很难分离的样品,用液相色谱常比用气相色谱容易完成分离
3和气相色谱相比,液相色谱对样品的回收比较容易,而且是定量的,样品的各个组分很容易被分离出来。因此,在很多场合,液相色谱不仅作为一种分析方法,而且可以作为一种分离手段,用以提纯和制备具有中等纯度的单一物质。在气相色谱中所分离出的各样品组分虽也可以回收,但一般都不太方便,而且定量性差。液相色谱法由于具有这些气相色谱法不具备的优点,因此在许多领域得到广泛的应用。
样品准备是成功的关键;在将所有样品加载到自动进样器中之前,必须对所有样品进行过滤,这一点非常重要。当使用uhplc时,如果不过滤样品,使用亚2微米颗粒的色谱柱进行---分离时很容易发生阻塞,这一点就尤为重要。对于流动相也是如此,尤其是在使用缓冲区的情况下。
对于样品使用正确的进样溶剂或稀释剂---,溶剂强度应等于或小于流动相起始条件的强度。如果使用太强的溶剂,则会观察到峰分裂和重现性差。如果自动进样器中使用的清洗溶剂太强,可能会观察到类似的问题。
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