低温生物菌种厂家- 北京开碧源

低温生物菌种——制备

也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。种子制备包括孢子制备和菌丝体制备见图，其中(1)～(4)为孢子制备过程。保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃或较高温度下培养5～7天(或较长时间)。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子，对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基。将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。菌孢子的培养基大多是采用麸皮或豌豆浸出液、---及无机盐与琼脂制成的。将斜面孢子接入扩大的扁瓶孢子培养基中,于28～37℃培养5～14天。所获得的大量孢子可直接作为种子罐 (6)的种子。如果有些生产菌种不产孢子，如产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶5液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源如---和氮源如玉米浆等,及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐(7)的种子应是生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

低温生物知多少？

实验室的传代保藏过程

1. 按说明书要求复溶菌粉，转种于适当的增菌培养基内g1，复壮后转接至平板上，并于适当温度下培养适当时间，分离出单个纯种菌落，此为第2代g2。

2. 鉴定完成后，挑取纯菌落制成浓菌悬液用于制备甘油冷冻管，同时挑取纯菌落转接斜面作为工作用。此时，保藏为第2代，但工作用则为第三代。

3. 将第2代管冷冻保存，将工作用于适当温度下培养适当时间后可用于试验。

4. 取一支冷冻保存的g2代转种于平板和斜面培养基上，平板上的制成冷冻保藏管第三代g3，斜面培养基经适当温度下培养适当时间后用作工作用w3。

5. 将第三代g3冷冻或低温保存，将生长、转种后的g2经灭菌处理后丢弃。

6. 当工作用代数小于5时，可直接用上一代工作用转接下一代工作用，如w3可直接转接为w4。

7. 按上述程序操作，直至g4转为w5为止，需重新开启安瓿，再重复上述操作程序、保藏和使用。

以上方法中，被分为两类。传代用和工作用，传代用用于甘油冷冻管法保藏，工作用用斜面低温保藏法保藏。

实验证明，甘油冷冻管的有效期至少为2年，但其主要适用于---需氧、酵母菌的传代、保藏、---和芽孢类---则需应用其它方法。

生物有机肥产品生产安全性分析

虽然目前生物有机肥产品生产大多采用植物根际促生菌， 但近年来很多研究发现，芽孢菌属和类芽孢菌个别菌株能产生菌素。 即便在安全分级目录中列为一级免做理学试验的， 开展生物有机肥产品生产生物安全风险评价， 从源头上把好安全关是产品安全的首要保障。通过-发现， 用于生物有机肥产品的部分生产分类---不明确， 甚至混乱， 难以从源头上进行安全风险的初步识别 。 以常见生产枯草芽孢菌为例， 实际上是一个表型相似的群体， 包括枯草芽孢菌、 地衣芽孢菌、 短小芽孢菌、解淀粉芽孢菌、 深褐 萎缩 芽孢菌、莫哈韦莫杰夫 芽孢菌、 死谷芽孢菌、 索诺拉沙漠芽孢菌、 特基拉芽孢菌、暹罗芽孢菌等 10个缘种。生产企业送检的枯草芽孢菌生物有机肥产品， 经鉴定发现很多产品实际为解淀粉芽孢菌， 且许多菌株具有很强的溶血作用。通过对生产企业-发现， 部分生产企业选择分离于动物肠道的解淀粉芽孢菌作为产品生产用菌株， 该类生产发酵周期短、 活菌数量高、 生产成本低， 但产品的应用功效不佳， 溶血风险大 ， 建议慎用。而植物来源的解淀粉芽孢菌溶血风险小， 产品应用效果好， 使用。

低温生物处理的优势

我国北方污水处理一直受到低温影响，尤其氨氮处理效果差、出水难以达标等问题的困扰。目前污水厂一般采用增加污泥浓度、水力停留时间、池体保温加盖等措施以提高处理效果，但投资和运行费用增加的问题也随之而来。温度降低所导致的生物处理效果下降，归根结底是由于当水温低于15℃时，处生化系统中存在的低温微生物的数量和活性不能达到常温下中温菌的水平，污水中的有机污染物质不能被迅速降解所导致的。因此，采用投加耐低温生物菌剂的方式对东北地区污水处理厂生化处理系统的耐低温改良，对低温快速启动和污水处理厂污水稳定达标排放意义重大。