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{微生物检测}{微生物限度}

——微生物限度检验量——

检验量检验量即一次试验所用的供试品量(g、ml 或c㎡)。

除另有规定外，一般供试品的检验量为10g 或10ml;膜剂为100c㎡;贵重---、微量包装---的检验量可以酌减。要求检查沙门菌的供试品，其检验量应增加20g 或20ml(其中10g或者10ml 用于阳性对照试验)。

检验时，应从2 个以上xiao包装单位中抽取供试品，大蜜丸还不得少于4丸，膜剂还不得少于4 片。

一般应随机抽取不少于检验用量(两个以上xiao包装单位)的3 倍量供试品。

微生物限度检查

微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温---和---的计数。

   当本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料等是否符合相应的微生物限度标准时，应按下述规定进行检验，包括样品的取样量和结果的判断等。除另有规定外，本法不适用于活菌制剂的检查。

   微生物计数试验环境应符合微生物限度检查的要求。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区域、工作台面及环境应定期进行监测。

   如供试品有抗jun活性，应尽可能去除或中和。供试品检查时，若使用了中和剂或灭活剂，应确认其有效性及对微生物---性。

   供试液制备时如果使用了表面活性剂，应确认其对微生物---性以及与所使用中和剂或灭活剂的相容性。

计数方法适用性试验

   1.供试液制备

   根据供试品的理化特性与生物学特性，采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时，应均匀加热，且温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1 小时。

   常用的供试液制备方法如下。如果下列供试液制备方法经确认均不适用，应建立其他适宜的方法。

   1水溶性供试品 取供试品，用ph7.0无菌----蛋白胨缓冲液，或ph7.2磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1：10供试液。我们可以创造一些条件只让所需的微生物生长，在这些条件下，所需要的微生物能有效地与其他微生物进行竞争，在生长能力方面远---过其他微生物。若需要，调节供试液ph值至6～8。---时，用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。

   2水不溶性非油脂类供试品 取供试品，用ph7.0无菌----蛋白胨缓冲液，或ph7.2磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基制备成1：10供试液。穿刺法:用接种针沾取的微生物经穿刺而进入半固体深层培养基中。分散力较差的供试品，可在稀释液中加入表面活性剂如0.1%的聚山梨酯80，使供试品分散均匀。若需要，调节供试液ph值至6～8。---时，用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。

   3油脂类供试品 取供试品，加入无菌十四烷酸---酯使溶解，或与zui少量并能使供试品乳化的无菌聚山梨酯80或其他无---性的无菌表面活性剂充分混匀。10-2010食品安全标准食品微生物学检验金黄色葡萄qiu菌检验gb4789。表面活性剂的温度一般不超过40℃特殊情况下，zui多不超过45℃，小心混合，若需要可在水浴中进行，然后加入预热的稀释液使成1：10供试液，保温，混合，并在zui短时间内形成乳状液。---时，用稀释液或含上述表面活性剂的稀释液进一步10倍系列稀释。

   3.mpn 法

   取规定量供试品，按方法适用性试验确认的方法进行供试液制备和供试品接种，所有试验管在30～35℃培养3～5天，如果需要确认是否有微生物生长，按方法适用性试验确定的方法进行。保藏方法：1、定期移植法亦称传代培养保藏法，指将junzhong接种于适宜的斜面培养基上，适条件下培养，完成培养于4～6℃进行保存并间隔一定时间(3-6个月)进行移植培养的一种短期种保藏方法。记录每一稀释级微生物生长的管数，从表3査每1g 或1ml供试品中需氧菌总数的可能数。

   结果判断

   需氧菌总数是指胰酪大豆胨琼脂培养基上生长的总菌落数包括---菌落数；霉菌和酵母菌总数是指沙氏---琼脂培养基上生长的总菌落数包括---菌落数。——微生物限度检验量——检验量检验量即一次试验所用的供试品量(g、ml或c㎡)。若因沙氏---琼脂培养基上生长的---使霉菌和酵母菌的计数结果不符合微生物限度要求，可使用含kang生素如氯霉su、庆大霉su的沙氏---琼脂培养基或其他选择性培养基如玫瑰红钠琼脂培养基进行霉菌和酵母菌总数测定。使用选择性培养基时，应进行培养基适用性检查。若采用mpn法，测定结果为需氧菌总数。